Podstawowe procedury laboratoryjne w ... - digicollection.or..

ZAPEWNIENIE JAKOŚCI BADAŃ BAKTERIOLOGICZNYCH
– surowicę słabo dodatnią (kontrola czułości);
– surowicę silnie dodatnią (kontrola miareczkowania), która powinna być
przygotowana w rozcieńczeniu odpowiadającym jej mianu uzyskanemu
w ostatnio wykonywanym teście.
• Zawsze zapisywać wszystkie miana surowic kontrolnych.
Oznaczanie wrażliwości na antybiotyki
Zalecane jest rutynowe stosowanie zmodyfikowanej metody Kirby-Bauera (str.
125). W celu uniknięcia błędów, należy przestrzegać poniższych zasad:
• Krążki powinny mieć właściwą średnicę (6,35 mm).
• Krążki powinny zawierać właściwe stężenie antybiotyku (tabela 24, str. 126).
• Zapas krążków powinien być przechowywany w zamrażarce (–20°C).
• Zestaw podręczny powinien być przechowywany nie dłużej niż 1 miesiąc
wchłodziarce (2 – 8°C).
• Do przeprowadzania badania jakości należy używać tylko agaru Mueller-
-Hintona.
• Właściwe pH (7,2 – 7,4) gotowego podłoża jest bardzo istotne w przypadku
niektórych antybiotyków.
• Gęstość inoculum powinna być standaryzowana, określona na podstawie
wzorca zmętnienia (str. 127).
• Pomiar wielkości strefy powinien być dokładny.
• Uzyskana średnica strefy zahamowania wzrostu powinna być interpretowana
według wartości granicznych podanych w tabeli. Średnica strefy
dla szczepów kontrolnych powinna zgadzać się z zakresami podanymi w tabeli
24 (str. 126).
• Trzy standardowe szczepy kontrolne, to 1 :
– Staphylococcus aureus (ATCC 25923; NCTC 6571);
– Escherichia coli (ATCC 25922; NCTC 10418);
– Pseudomonas aeruginosa (ATCC 27853; NCTC 10622).
• Badania kontrolne z wykorzystaniem wymienionych szczepów powinny być
przeprowadzane:
– dla każdej nowej partii krążków;
– dla każdej nowej partii podłoży;
– raz w tygodniu, równolegle do antybiogramów wykonywanych rutynowo.
• W celu zapisu i interpretacji wyników kontroli jakości, zalecane jest stosowanie
wykresu przedstawionego na ryc. 16 (str. 137).
Pozyskiwanie i przechowywanie
szczepów kontrolnych
Wybór szczepów iźródło ich pochodzenia
Należy wybrać szczepy, których maksymalna liczba morfologicznych, metabolicznych
i serologicznych cech może być identyfikowana możliwie najmniejszą
liczbą testów; zalecane szczepy kontrolne zebrano w tabeli 2.
1
Wymienione szczepy mogą być uzyskane z: American Type Culture Collection (ATCC), 10801
University Boulevard, Manassas, VA 20110, USA; lub National Collection of Type Cultures (NCTC),
PHLS Central Public Health Laboratory, 61 Colindale Avenue, London NW9 5HT, England.
24