Podstawowe procedury laboratoryjne w ... - digicollection.or..
Podstawowe procedury laboratoryjne w ... - digicollection.or..
Podstawowe procedury laboratoryjne w ... - digicollection.or..
You also want an ePaper? Increase the reach of your titles
YUMPU automatically turns print PDFs into web optimized ePapers that Google loves.
OZNACZANIE WRAŻLIWOŚCI NA ANTYBIOTYKI<br />
Czynniki techniczne wpływaja˛ce na wielkość<br />
strefy zahamowania w metodzie<br />
dyfuzyjno-kra˛żkowej<br />
Gęstość inoculum<br />
W przypadku zbyt małej gęstości inoculum uzyskana strefa zahamowania,<br />
niezależnie od wrażliwości mikro<strong>or</strong>ganizmu, będzie większa. Z tego powodu<br />
op<strong>or</strong>ne szczepy mogą zostać opisane jako wrażliwe. W odwrotnej sytuacji, zbyt<br />
dużej gęstości inoculum, wielkość uzyskanej strefy będzie mniejsza i szczepy<br />
wrażliwe mogą zostać opisane jako op<strong>or</strong>ne. Zwykle najlepsze wyniki uzyskuje się<br />
przygotowując inoculum warunkujące prawie zlewny wzrost.<br />
Czas nałożenia kra˛żków<br />
Na posianych płytkach, pozostawionych w temperaturze pokojowej dłużej niż<br />
podano w procedurze, przed nałożeniem krążków dochodzi do namnażania<br />
szczepów. W rezultacie średnica strefy zahamowania jest mniejsza i szczepy<br />
wrażliwe mogą zostać opisane jako op<strong>or</strong>ne.<br />
Temperatura inkubacji<br />
W celu otrzymania optymalnego wzrostu podłoża z antybiogramem należy<br />
inkubować w35°C. Jeśli temperatura jest niższa, wydłuża się czas inkubacji,<br />
a uzyskane strefy są większe. W przypadku badania wrażliwości heterogennie<br />
op<strong>or</strong>nych szczepów Staphylococcus aureus na metycylinę (oksacylinę) część<br />
op<strong>or</strong>ną populacji wykrywa się w35°C. W wyższych temperaturach cała hodowla<br />
wykazuje wrażliwość. W temperaturze 35°C i niższej w strefie zahamowania<br />
rosną op<strong>or</strong>ne kolonie. Opisane kolonie są lepiej widoczne, jeśli przed odczytem<br />
płytkę pozostawi się na kilka godzin w temperaturze pokojowej. Należy zawsze<br />
zidentyfikować ten typ kolonii, wykluczając zanieczyszczenie.<br />
Czas inkubacji<br />
Większość metod uwzględnia 16 – 18-godzinny okres inkubacji. Jakkolwiek<br />
w wyjątkowych sytuacjach wstępny wynik może zostać przygotowany po<br />
6 godzinach. Nie jest to metoda zalecana i w każdym przypadku wyniki należy<br />
potwierdzić po odpowiednim czasie inkubacji.<br />
Rozmiar płytek, grubość warstwy podłoża<br />
agarowego i rozmieszczenie kra˛żków<br />
z antybiotykami<br />
Testy wrażliwości przeprowadza się zwykle na płytkach o średnicy 9 – 10 cm,<br />
umieszczając nie więcej niż 6 – 7 krążków na każdej z nich. W przypadku badania<br />
wrażliwości na większą liczbę antybiotyków zaleca się użycie dwóch płytek lub<br />
134
Change language