Podstawowe procedury laboratoryjne w ... - digicollection.or..
Podstawowe procedury laboratoryjne w ... - digicollection.or..
Podstawowe procedury laboratoryjne w ... - digicollection.or..
Create successful ePaper yourself
Turn your PDF publications into a flip-book with our unique Google optimized e-Paper software.
CZE˛ŚĆ I<br />
oceniać w cotygodniowych odstępach. Po zaobserwowaniu jakiegokolwiek<br />
wzrostu, najlepiej w bakteriologicznie bezpiecznych kom<strong>or</strong>ach, należy przygotować<br />
preparat, wysuszyć, utrwalić ciepłem i wybarwić metodą Ziehl-Neelsena.<br />
Obecność kwasoop<strong>or</strong>nych prątków jest równoznaczna z diagnozą gruźlicy.<br />
Wszystkie izolaty powinny zostać przesłane do lab<strong>or</strong>at<strong>or</strong>ium referencyjnego<br />
w celu potwierdzenia diagnozy i określenia lekowrażliwości.<br />
Gdy na podstawie barwienia tuszem chińskim lub objawów klinicznych podejrzewa<br />
się zakażenie Cryptococcus neof<strong>or</strong>mans, należy wykonać posiewy z osadu<br />
do dwóch probówek z agarem Sabouraud i inkubować w35°C do miesiąca.<br />
C. neof<strong>or</strong>mans rośnie takżenapłytkach zawierających agar z krwią, które, jeśli to<br />
wskazane, powinny być inkubowane w 35°C przez tydzień.<br />
Wstępna identyfikacja<br />
Wzrost na agarze MacConkeya sugeruje obecność Enterobacteriaceae, która<br />
następnie powinna być potwierdzona z użyciem metod i podłoży zalecanych dla<br />
patogenów jelitowych.<br />
Kolonie Gram-dodatnich ziarenkowców ze strefą brzeżnej hemolizy typu β mogą<br />
wskazywać na obecność S. agalactiae (paci<strong>or</strong>kowce grupy B), która powinna<br />
zostać potwierdzona w odwrotnym teście CAMP (str. 117).<br />
Płaskie kolonie z wklęsłą częścią centralną i niewielką zieloną strefą hemolizy<br />
typu α to prawdopodobnie S. pneumoniae. Dla potwierdzenia należy na agarze<br />
z krwią, zawierającym gęsto posiane czyste kolonie badanego szczepu, umieścić<br />
6-milimetrowy krążek z optochiną.Pocałonocnej inkubacji pneumokoki wykażą<br />
14-milimetrową lub większą strefę zahamowania wzrostu wokół krążka. Najlepsze<br />
rezultaty uzyskuje się po inkubacji na agarze zawierającym krew baranią<br />
w atmosferze wzbogaconej w dwutlenek węgla. Jeśli odczyt pierwszej hodowli na<br />
agarze z krwią nie jest jednoznaczny, należy przesiać szczep i powtórzyć badanie.<br />
Kolonie H. influenzae rosną tylko na agarze czekoladowym <strong>or</strong>az jako kolonie<br />
satelitarne w pobliżu gronkowcowych posiewów na agarze z krwią. Dalsza<br />
identyfikacja może być przeprowadzona w teście aglutynacji szkiełkowej przy<br />
użyciu surowicy odp<strong>or</strong>nościowej H. influenzae typ b.<br />
Gram-ujemne dwoinki rosnące na agarze z krwią lub agarze czekoladowym, które<br />
dają szybko dodatni test oksydazowy, mogą być uznane za meningokoki.<br />
Potwierdzenie i identyfikacja grup serologicznych N. meningitidis (A, B, C) są<br />
oparte na odczynie aglutynacji szkiełkowej z użyciem właściwych surowic<br />
odp<strong>or</strong>nościowych. Ujemny odczyn aglutynacji nie wyklucza meningokoków,<br />
ponieważ istnieją co najmniej cztery dodatkowe serogrupy. W tej sytuacji dla<br />
izolowanych szczepów należy określić zdolność do rozkładu węglowodanów,<br />
a hodowle przesłać do referencyjnego lab<strong>or</strong>at<strong>or</strong>ium centralnego. Wstępne wyniki<br />
powinny być przedstawiane lekarzowi na każdym etapie identyfikacji (barwienie<br />
metodą Grama, wzrost, aglutynacja itp.), z komentarzem, że zostanie przygotowany<br />
rap<strong>or</strong>t końcowy.<br />
Kolonie Gram-dodatnich pałeczek z brzeżną strefą β-hemolizy na agarze z krwią<br />
mogą wskazywać na Listeria monocytogenes. Zalecane jest wykonanie następujących<br />
testów potwierdzenia: dodatnia reakcja z katalazą, ruch w podłożu<br />
płynnym lub w MIU, wzrost i czarne przebarwienie na agarze z żółcią i eskuliną.<br />
39
Change language