Podstawowe procedury laboratoryjne w ... - digicollection.or..
Podstawowe procedury laboratoryjne w ... - digicollection.or..
Podstawowe procedury laboratoryjne w ... - digicollection.or..
Create successful ePaper yourself
Turn your PDF publications into a flip-book with our unique Google optimized e-Paper software.
BADANIA SEROLOGICZNE<br />
8. Kartoniki w kom<strong>or</strong>ze wilgotnej wstawić na 8 minut na wytrząsarkę. Jeśli<br />
wytrząsarka nie jest dostępna, kartoniki kołysać ręcznie, ciągłym ruchem<br />
kolistym przez 2 minuty, następnie umieścić na 6 minut w wilgotnej kom<strong>or</strong>ze<br />
zawierającej mokrą bibułkę lub inny materiał. Wyjąć kartonik i obracać przez<br />
chwilę, do uzyskania końcowego wyniku. Uważać, aby nie zmieszać próbek<br />
ze sobą.<br />
9. Po zdjęciu z wytrząsarki obejrzeć kartoniki w dobrym świetle. Najwyższe<br />
rozcieńczenie z widoczną makroskopowo reakcją jest mianem próbki.<br />
10. Jeśli próbka jest dodatnia przy 1:32, należy wykonać dodatkowe serie<br />
rozcieńczeń. Przygotować roztwór 1:16 z NaCl (0,85%), a następnie<br />
w opisany wyżej sposób rozcieńczyć surowicę.<br />
Odczyn immunoflu<strong>or</strong>escencji krętków<br />
w modyfikacji abs<strong>or</strong>pcyjnej<br />
(FTA-Abs)<br />
W teście FTA-Abs wyk<strong>or</strong>zystuje się utrwalony acetonem na szkiełku antygen<br />
Treponema pallidum (szczep Nicholsa). Można również użyć zawieszonych<br />
w roztw<strong>or</strong>ze soli liofilizowanych komórek T. pallidum. Inaktywowaną surowicę<br />
pacjenta inkubuje się z krętkami Reitera, wiążącymi niespecyficzne przeciwciała<br />
krętkowe. Po abs<strong>or</strong>pcji surowicę umieszcza się na szkiełku. Specyficzne<br />
przeciwciała z surowicy wiążą się na powierzchni komórek krętków. Po spłukaniu<br />
dodaje się koniugatu znakowanych flu<strong>or</strong>escencyjnie (izotiocyjanian flu<strong>or</strong>esceiny)<br />
przeciwciał przeciw ludzkim immunoglobulinom. Koniugat zostanie związany<br />
przez przeciwciała obecne na powierzchni krętków i uwidoczniony w mikroskopie<br />
flu<strong>or</strong>escencyjnym.<br />
Dodatni odczyn pojawia się trzy tygodnie po zakażeniu i utrzymuje się<br />
u nieleczonych pacjentów Może być także obserwowany kilka lat po skutecznym<br />
leczeniu we wczesnej fazie i przetrwać u ch<strong>or</strong>ych, u których terapię wprowadzono<br />
dopiero w późnej fazie ch<strong>or</strong>oby. Dodatni wynik testu z dużym prawdopodobieństwem<br />
wskazuje na zakażenie kiłą. Fałszywie ujemne wyniki uzyskuje się<br />
wyjątkowo rzadko i związane są prawdopodobnie ze złą jakością antygenu.<br />
Fałszywie dodatnie wyniki mogą być efektem obniżonej jakości odczynników,<br />
a w rezultacie niedostatecznej eliminacji nieswoistych przeciwciał w procesie<br />
abs<strong>or</strong>pcji. Fałszywie dodatnie wyniki obserwowano również u pacjentów z marskością<br />
wątroby, zapaleniem żołędzi, kolagenozą, opryszczką narządów płciowych,<br />
toczniem rumieniowatym i bardzo rzadko u kobiet w ciąży <strong>or</strong>az u zdrowych<br />
osób z nieznanych przyczyn.<br />
Wykazano krzyżową reakcję między T. pallidum i B<strong>or</strong>relia burgd<strong>or</strong>feri (ch<strong>or</strong>oba<br />
z Lyme). Próbki z nieprop<strong>or</strong>cjonalnie wysokim mianem w teście FTA-Abs,<br />
w p<strong>or</strong>ównaniu z innymi serologicznymi testami kiłowymi, powinny zostać<br />
przebadane w kierunku obecności przeciwciał przeciw B<strong>or</strong>relia.<br />
Główną zaletą odczynu FTA-Abs jest jego wysoka swoistość i czułość <strong>or</strong>az<br />
wczesna reaktywność. Wyniki są wiarygodne i mogą być decydujące w wątpliwych<br />
przypadkach. Test FTA-Abs jest jednak czasochłonny i drogi; wymaga<br />
dobrego wyszkolenia personelu przeprowadzającego badanie i odczytującego<br />
wyniki. Powinien więc być traktowany jako test potwierdzenia w przypadkach<br />
niepewnej diagnozy.<br />
148
Change language