Podstawowe procedury laboratoryjne w ... - digicollection.or..

KREW
W rutynowych posiewach krwi inkubacja dłuższa niż 7 dni nie jest konieczna.
W niektórych przypadkach inkubacja może być przedłużona o kolejne 7 dni, na
przykład przy podejrzeniu zakażenia pałeczkami Brucella lub innymi mikroorganizmami
o wysokich wymaganiach odżywczych, w przypadku zapalenia
wsierdzia lub jeśli pacjent jest w trakcie antybiotykoterapii.
Próbki krwi z niewidocznym wzrostem
Niektóre mikroorganizmy mogą rosnąć bez zmętnienia lub widocznych zmian
w podłożu. Inne, jak na przykład pneumokoki, wykazują tendencję do autolizy
i szybko giną. Z tego powodu niektóre laboratoria prowadzą rutynowe przesiewy
na agar czekoladowy po 18 – 24 godzinach inkubacji. Próbki z niewidocznym
wzrostem mogą być opracowywane w siódmym dniu inkubacji przez przeniesienie
kilku kropel dobrze zmieszanej hodowli krwi (z użyciem sterylnych pipet
Pasteura) do probówki z podłożem tioglikolanowym, którą inkubuje się i obserwuje
przez kolejne 3 dni.
Antybiogram
Przy podejrzeniu obecności gronkowców lub Gram-ujemnych pałeczek można
oszczędzając czas wykonać bezpośredni, niestandaryzowany antybiogram, używając
dodatnich próbek jako inoculum. Sterylną wymazówkę należy zanurzyć we
wstrząśniętym podłożu i odsączając nadmiar płynu, posiać na podłoże Mueller-
-Hintona jak w metodzie standardowej (patrz str. 126). Wstępny odczyt może być
wykonany po 6 – 8 godzinach inkubacji. W 95% przypadków rezultaty uzyskane
tą metodą są zgodne ze standaryzowanym testem.
Zanieczyszczenia
Zanieczyszczenia hodowli krwi można uniknąć przez staranne przygotowanie
skóry i dokładne przestrzeganie procedur aseptycznych w czasie posiewu
i przesiewów. Jednakże nawet w idealnych warunkach 3 – 5% posiewów krwi jest
,,skażonych’’ bakteriami ze skóry (S. epidermidis, P. acnes, Clostridium spp.,
dyfteroidy) lub ze środowiska (Acinetobacter spp., Bacillus spp.).
Powyższe mikroorganizmy mogą być w niektórych sytuacjach patogenne,
wywołując np. zapalenie wsierdzia. Rzeczywistą infekcję należy podejrzewać
w poniżej wymienionych sytuacjach:
– jeżeli ten sam organizm wyhodowano z dwóch butelek tej samej próbki krwi;
– jeżeli ten sam organizm rośnie w hodowli więcej niż jednej próbki;
– jeżeli wzrost jest szybki (w ciągu 48 godzin);
– jeżeli różne izolaty jednego gatunku wykazują ten sam biotyp i wzór
lekowrażliwości.
Wszystkie wyniki hodowli powinny być przedstawiane lekarzowi łącznie
z wynikami próbek prawdopodobnie zanieczyszczonych. Jednakże dla tych
ostatnich nie należy wykonywać antybiogramu, a jedynie umieścić na wyniku
odpowiedni komentarz, np. Propionibacterium acnes (flora skóry), Staphylococcus
epidermidis (prawdopodobnie zanieczyszczenie). Jest to istotne dla
nawiązania dobrej współpracy między lekarzami a personelem laboratorium.
34