Podstawowe procedury laboratoryjne w ... - digicollection.or..
Podstawowe procedury laboratoryjne w ... - digicollection.or..
Podstawowe procedury laboratoryjne w ... - digicollection.or..
You also want an ePaper? Increase the reach of your titles
YUMPU automatically turns print PDFs into web optimized ePapers that Google loves.
KAŁ<br />
wykazują ruch, w preparacie widoczne są jako lekko lub spiralnie zagięte pałeczki<br />
(kształt skrzydeł mewy lub ,,S’’). Jeśli wystąpią ww. cechy, zanotować: ,,izolacja<br />
Campylobacter (wstępna identyfikacja)’’.<br />
Clostridium difficile<br />
Kolonie C. difficile na podłożu CCFA są duże, żółte, ze szklistą podstawą. Na<br />
agarze z krwią wśrodowisku beztlenowym kolonie mogą wykazywać różną<br />
m<strong>or</strong>fologię, dlatego niezbędna jest identyfikacja bakterii na podstawie innych<br />
cech. Typowe kolonie na tym podłożusąszare, nieprzejrzyste, bez cech hemolizy<br />
po 24 – 48 godzinach, tylko niekiedy zielononiebieskie z powodu α-hemolizy.<br />
Po 48 – 72 godzinach inkubacji może pojawić się wyraźne szare zabarwienie<br />
z białym centrum. Z doświadczenia wynika jednak, że mimo różnic w m<strong>or</strong>fologii<br />
kolonii C. difficile jest łatwo rozpoznawany na podstawie charakterystycznego<br />
zapachu, przypominającego odchody końskie. Jeśli kolonie są lecytynazoi<br />
lipazoujemne, a ponadto wykazują żółtozieloną flu<strong>or</strong>escencję wświetle lampy<br />
Wooda, należy zanotować: ,,izolacja Clostridium difficile (wstępna identyfikacja)’’.<br />
Końcowa identyfikacja mikrobiologiczna<br />
Przed wydaniem wyniku należy sprawdzić czystość hodowli i potwierdzić<br />
identyfikację za pomocą dodatkowych testów biochemicznych.<br />
1. Pobrać zpłytki dobrze odgraniczone od innych kolonie i przesiać na bulion<br />
odżywczy w celu wykonania testów biochemicznych, na skos agarowy do<br />
testów serologicznych <strong>or</strong>az na płytkę MacConkeya w celu potwierdzenia<br />
czystości hodowli.<br />
2. Wykonać dodatkowe testy biochemiczne zgodnie z tabelami. Wyniki odczytać<br />
po całonocnej inkubacji i zidentyfikować izolowane szczepy.<br />
Identyfikacja Shigella i Salmonella może niekiedy stanowić problem, ponieważ<br />
niektóre szczepy różnią się wynikami reakcji biochemicznych, a także mogą<br />
wykazywać obecność antygenów wspólnych z innymi Gram-ujemnymi bakteriami.<br />
Nieruchliwe, laktozoujemne, nie wytwarzające gazu szczepy E. coli są<br />
często trudne do odróżnienia od szczepów Shigella, a ponadto identyfikacja może<br />
być skomplikowana w związku z faktem wywoływania czerwonki bakteryjnej<br />
przez niektóre z tych szczepów.<br />
Salmonella<br />
Jeśli wyniki wstępnych testów wskazują na obecność szczepów Salmonella,<br />
należy posiać szczepy na podłoże z <strong>or</strong>nityną, podłoże Simmonsa z cytrynianem,<br />
ONPG i wodę peptydową wzbogaconą mannitolem, ramnozą, trehalozą lub<br />
ksylozą. Obserwować reakcje po całonocnej inkubacji i zidentyfikować szczepy<br />
według schematu przedstawionego w tabeli 12. Jeśli wyniki wskazują na hodowlę<br />
Salmonella, przeprowadzić identyfikację serologiczną.<br />
62