24.10.2014 Views

Podstawowe procedury laboratoryjne w ... - digicollection.or..

Podstawowe procedury laboratoryjne w ... - digicollection.or..

Podstawowe procedury laboratoryjne w ... - digicollection.or..

SHOW MORE
SHOW LESS

You also want an ePaper? Increase the reach of your titles

YUMPU automatically turns print PDFs into web optimized ePapers that Google loves.

KAŁ<br />

wykazują ruch, w preparacie widoczne są jako lekko lub spiralnie zagięte pałeczki<br />

(kształt skrzydeł mewy lub ,,S’’). Jeśli wystąpią ww. cechy, zanotować: ,,izolacja<br />

Campylobacter (wstępna identyfikacja)’’.<br />

Clostridium difficile<br />

Kolonie C. difficile na podłożu CCFA są duże, żółte, ze szklistą podstawą. Na<br />

agarze z krwią wśrodowisku beztlenowym kolonie mogą wykazywać różną<br />

m<strong>or</strong>fologię, dlatego niezbędna jest identyfikacja bakterii na podstawie innych<br />

cech. Typowe kolonie na tym podłożusąszare, nieprzejrzyste, bez cech hemolizy<br />

po 24 – 48 godzinach, tylko niekiedy zielononiebieskie z powodu α-hemolizy.<br />

Po 48 – 72 godzinach inkubacji może pojawić się wyraźne szare zabarwienie<br />

z białym centrum. Z doświadczenia wynika jednak, że mimo różnic w m<strong>or</strong>fologii<br />

kolonii C. difficile jest łatwo rozpoznawany na podstawie charakterystycznego<br />

zapachu, przypominającego odchody końskie. Jeśli kolonie są lecytynazoi<br />

lipazoujemne, a ponadto wykazują żółtozieloną flu<strong>or</strong>escencję wświetle lampy<br />

Wooda, należy zanotować: ,,izolacja Clostridium difficile (wstępna identyfikacja)’’.<br />

Końcowa identyfikacja mikrobiologiczna<br />

Przed wydaniem wyniku należy sprawdzić czystość hodowli i potwierdzić<br />

identyfikację za pomocą dodatkowych testów biochemicznych.<br />

1. Pobrać zpłytki dobrze odgraniczone od innych kolonie i przesiać na bulion<br />

odżywczy w celu wykonania testów biochemicznych, na skos agarowy do<br />

testów serologicznych <strong>or</strong>az na płytkę MacConkeya w celu potwierdzenia<br />

czystości hodowli.<br />

2. Wykonać dodatkowe testy biochemiczne zgodnie z tabelami. Wyniki odczytać<br />

po całonocnej inkubacji i zidentyfikować izolowane szczepy.<br />

Identyfikacja Shigella i Salmonella może niekiedy stanowić problem, ponieważ<br />

niektóre szczepy różnią się wynikami reakcji biochemicznych, a także mogą<br />

wykazywać obecność antygenów wspólnych z innymi Gram-ujemnymi bakteriami.<br />

Nieruchliwe, laktozoujemne, nie wytwarzające gazu szczepy E. coli są<br />

często trudne do odróżnienia od szczepów Shigella, a ponadto identyfikacja może<br />

być skomplikowana w związku z faktem wywoływania czerwonki bakteryjnej<br />

przez niektóre z tych szczepów.<br />

Salmonella<br />

Jeśli wyniki wstępnych testów wskazują na obecność szczepów Salmonella,<br />

należy posiać szczepy na podłoże z <strong>or</strong>nityną, podłoże Simmonsa z cytrynianem,<br />

ONPG i wodę peptydową wzbogaconą mannitolem, ramnozą, trehalozą lub<br />

ksylozą. Obserwować reakcje po całonocnej inkubacji i zidentyfikować szczepy<br />

według schematu przedstawionego w tabeli 12. Jeśli wyniki wskazują na hodowlę<br />

Salmonella, przeprowadzić identyfikację serologiczną.<br />

62

Hooray! Your file is uploaded and ready to be published.

Saved successfully!

Ooh no, something went wrong!