Podstawowe procedury laboratoryjne w ... - digicollection.or..
Podstawowe procedury laboratoryjne w ... - digicollection.or..
Podstawowe procedury laboratoryjne w ... - digicollection.or..
You also want an ePaper? Increase the reach of your titles
YUMPU automatically turns print PDFs into web optimized ePapers that Google loves.
CZE˛ŚĆ I<br />
Powyższa temperatura hamuje wzrost naturalnej fl<strong>or</strong>y jelitowej, nie wpływającna<br />
wzrost bakterii z rodzaju Campylobacter. Podczas izolacji gatunków nie tolerujących<br />
podwyższonej temperatury, inkubacja powinna być prowadzona<br />
w35– 37°C.<br />
Ryc. 6. Posiew bakterii na płytkę.<br />
• Odpowiednie warunki wzrostu dla Campylobacter spp. są uzyskiwane na kilka<br />
sposobów. Wybór metody zależy od zakresu i obciążenia pracą danego<br />
lab<strong>or</strong>at<strong>or</strong>ium <strong>or</strong>az relatywnych kosztów.<br />
• Eksykat<strong>or</strong> zapewnia atmosferę zawierającą ok. 17 – 19% O 2<br />
i2– 3% CO 2<br />
. Nie<br />
są to optymalne warunki wzrostu Campylobacter spp. i nie wszystkie szczepy<br />
w nich wyrosną. Według niektórych źródeł inkubacja w 42°C podłoży<br />
z dodatkiem FBP wpływa k<strong>or</strong>zystnie na skuteczność izolacji. Dodatek FBP<br />
inaktywując nadtlenki i nadtlenek wod<strong>or</strong>u poprawia tolerancję tlenu przez<br />
Campylobacter spp. Ujemną stroną metody jest dłuższa inkubacja i zahamowanie<br />
wzrostu niektórych wrażliwych na tlen Campylobacter spp.<br />
• Inna prosta i niedroga metoda wyk<strong>or</strong>zystuje technikę wspólnych hodowli.<br />
Płytki z szybko rosnącymi fakultatywnie beztlenowymi bakteriami inkubowane<br />
są zpłytkami do izolacji Campylobacter spp. w zamkniętym pojemniku lub<br />
plastikowym w<strong>or</strong>eczku. Przy wzroście fakultatywnie beztlenowych bakterii<br />
zawartość tlenu maleje, a CO 2<br />
rośnie. Ujemną stroną metody jest zwykle<br />
dłuższy czas inkubacji potrzebny do wzrostu Campylobacter spp.<br />
• Komercyjnie dostępna jest specjalnie przystosowana do izolacji Campylobacter<br />
spp. saszetka z generat<strong>or</strong>em wod<strong>or</strong>u i CO 2 <strong>or</strong>az katalizat<strong>or</strong>em. Saszetkę<br />
należy umieścić w anaerostacie używając każd<strong>or</strong>azowo przy otwarciu pojemnika<br />
nowej saszetki. Aby uzyskać maksymalną skuteczność izolacji, w słoju nie<br />
należy umieszczać więcej niż sześciu płytek.<br />
• Zestaw do inkubacji w plastikowym w<strong>or</strong>eczku jest także dostępny komercyjnie.<br />
Wskład zestawu wchodzi plastikowy w<strong>or</strong>eczek, za każdym razem opróżniany<br />
dwu- lub trzykrotnie ręcznie bądź za pomocą próżniociągu, a następnie<br />
każd<strong>or</strong>azowo wypełniany 5% O 2 , 10% CO 2 i 85% N 2 .<br />
• System opróżnianego i wypełnianego anaerostatu bez katalizat<strong>or</strong>a. Pojemnik<br />
jest dwukrotnie opróżniany do uzyskania ciśnienia 38 cm (15 mm Hg)<br />
i wypełniany za każdym razem mieszaniną 10% H 2<br />
i 90% N 2<br />
.<br />
55
Change language