Podstawowe procedury laboratoryjne w ... - digicollection.or..
Podstawowe procedury laboratoryjne w ... - digicollection.or..
Podstawowe procedury laboratoryjne w ... - digicollection.or..
Create successful ePaper yourself
Turn your PDF publications into a flip-book with our unique Google optimized e-Paper software.
CZE˛ŚĆ I<br />
Jakościowy odczyn RPR<br />
1. Wyjąć zestaw odczynników z lodówki i pozostawić do ogrzania do temperatury<br />
pokojowej.<br />
2. Przygotować surowicę kontrolną, dodając wskazaną objętość wody destylowanej.<br />
3. Opisać każdy dołeczek na kartoniku RPR lab<strong>or</strong>at<strong>or</strong>yjnym numerem badania,<br />
pozostawiając miejsce dla dodatniej, słabo dodatniej i ujemnej surowicy<br />
kontrolnej.<br />
4. Za pomocą jedn<strong>or</strong>azowego zakraplacza umieścić 50 µl surowicy lub osocza<br />
w odpowiednim dołeczku. Dla każdej próbki użyć nowego zakraplacza.<br />
5. Delikatnie wstrząsnąć zawiesiną antygenu i do każdego dołeczka, dozującą<br />
igłą z zestawu, dodać bezkontaktowo kroplę antygenu. Ostrożnie wymieszać<br />
zawiesinę antygenu z surowicą. Dla każdej próbki użyć nowego mieszadełka.<br />
Dokładnie rozprowadzić.<br />
6. Kartoniki w kom<strong>or</strong>ze wilgotnej wstawić na 8 minut na wytrząsarkę. Jeśli<br />
wytrząsarka nie jest dostępna, kartoniki kołysać ręcznie, ciągłym ruchem<br />
kolistym przez 2 minuty, następnie umieścić na 6 minut w wilgotnej kom<strong>or</strong>ze<br />
zawierającej zwilżoną bibułę lub inny materiał. Wyjąć kartonik i obracać przez<br />
chwilę, do uzyskania końcowego wyniku. Uważać, aby nie zmieszać próbek ze<br />
sobą.<br />
7. Po zdjęciu z wytrząsarki obejrzeć kartoniki w dobrym świetle. Dodatnia<br />
surowica kontrolna powinna wykazywać wyraźnie widoczną reakcję. Ujemna<br />
surowica kontrolna nie wykazuje reakcji. Krótkie obracanie i przechylanie<br />
kartonika w rękach może pomóc w zróżnicowaniu słabo dodatnich i ujemnych<br />
próbek.<br />
8. Zapisać wynik badania:<br />
• Małe lub duże kłaczkowate skupiska: dodatni.<br />
• Jednolite zmętnienie zawiesiny cząsteczek: ujemny.<br />
9. Przygotować seryjne rozcieńczenia każdej dodatniej surowicy w celu oznaczenia<br />
miana.<br />
Półilościowy odczyn RPR<br />
1. Wyjąć zestaw odczynników z lodówki i pozostawić do ogrzania do<br />
temperatury pokojowej.<br />
2. Opisać rząd 5 dołeczków na kartoniku RPR lab<strong>or</strong>at<strong>or</strong>yjnym numerem<br />
badania.<br />
3. Za pomocą jedn<strong>or</strong>azowego zakraplacza dodać do każdego dołeczka po<br />
1 kropli roztw<strong>or</strong>u NaCl (0,85%). Nie rozprowadzać.<br />
4. Za pomocą nowego zakraplacza nanieść 1 kroplę próbki surowicy do<br />
pierwszego dołeczka. Wymieszać zakraplaczem (zaciągając i wypuszczając<br />
zawartość 5 – 6-krotnie; unikać tw<strong>or</strong>zenia się pęcherzyków).<br />
5. Przenieść 50 µl mieszaniny (rozcieńczenie 1:2) do następnego dołeczka.<br />
Wymieszać. Powtórzyć całą czynność do piątego dołeczka włącznie (rozcieńczenie<br />
1:32). Usunąć 50 µl mieszaniny z ostatniego rozcieńczenia.<br />
6. Rozprowadzić przygotowane próbki w dołeczkach, rozpoczynając<br />
od najwyższego rozcieńczenia. Dla każdej próbki użyć nowego mieszadełka.<br />
7. Za pomocą dozującej igły dodać bezkontaktowo do każdego dołeczka<br />
1 kroplę delikatnie wstrząśniętego antygenu. Ostrożnie wymieszać zawiesinę<br />
antygenu z surowicą. Dokładnie rozprowadzić. Do każdej próbki użyć<br />
nowego mieszadełka.<br />
147
Change language