Podstawowe procedury laboratoryjne w ... - digicollection.or..
Podstawowe procedury laboratoryjne w ... - digicollection.or..
Podstawowe procedury laboratoryjne w ... - digicollection.or..
Create successful ePaper yourself
Turn your PDF publications into a flip-book with our unique Google optimized e-Paper software.
BADANIA SEROLOGICZNE<br />
Wszystkie pipety należy zanurzyć w detergencie tak, aby roztwór wniknął do<br />
wewnątrz. Płukać pod bieżącą wodą co najmniej 30 minut, a następnie w wodzie<br />
destylowanej. Szklane płytki używane do odczynów VDRL muszą zostać<br />
starannie oczyszczone z pozostałości detergentu i resztek olejku. Należy unikać<br />
przedłużonego moczenia w detergencie ze względu na możliwość uszkodzenia<br />
pierścieni ceramicznych na płytkach. Szklane płytki z pierścieniami z parafiny<br />
powinny być czyszczone z użyciem właściwych rozpuszczalników <strong>or</strong>ganicznych<br />
(np. benzyny).<br />
W odczynie RPR i VDRL do przygotowywania i rozcieńczania antygenu<br />
wyk<strong>or</strong>zystuje się igły kalibrowane. W zestawie do odczynu RPR znajduje się<br />
igła, którą należy sprawdzić przed użyciem, określając liczbę kropli/ml. Prawidłowo<br />
funkcjonująca 20-podziałkowa igła powinna dozować 90 kropli/ml. Nie<br />
należy stosować igieł działających niewłaściwie. Po użyciu umyć wodą destylowaną.<br />
Do testu VDRL przygotować dwie igły, odłamując czubki za pomocą<br />
szczypiec. Sprawdzić igłę określając liczbę kropli/ml: 18-podziałkowa igła<br />
powinna dozować 60 kropli/ml, a 21 – 22-podziałkowa 100 kropli/ml. Każdą<br />
nieprawidłowo działającą igłę należy odrzucić lub wyregulować, dociskając lub<br />
zwalniając koniec. Po użyciu umyć w wodzie destylowanej, 70% etanolu<br />
i acetonie.<br />
Odczynniki<br />
Związki chemiczne stosowane w serologii muszą mieć jakość odczynników<br />
i spełniać kryteria określonej <strong>procedury</strong>. Muszą być przechowywane zgodnie<br />
z zaleceniami producenta.<br />
Do przygotowania odczynników powinna być używana wysokiej jakości woda<br />
destylowana o pH 7,0. Należy przechowywać ją w odpowiednio opisanym z datą,<br />
ciepłoodp<strong>or</strong>nym szklanym naczyniu lub plastikowej butli ze szczelnie domkniętą<br />
zakrętką.<br />
Fizjologiczny roztwór soli jest używany sam lub jako roztwór buf<strong>or</strong>owany, na<br />
przykład buf<strong>or</strong>em fosf<strong>or</strong>anowym. W wilgotnym klimacie, w celu usunięcia wody,<br />
chl<strong>or</strong>ek sodu należy suszyć g<strong>or</strong>ącym powietrzem w 160 – 180°C przez 30 minut.<br />
Sól rozpuścić w wodzie destylowanej lub demineralizowanej i przechowywać<br />
w ciepłoodp<strong>or</strong>nym, odpowiednio opisanym z datą szklanym naczyniu lub<br />
plastikowej butli, ze szczelnie zamkniętą zakrętką. Przed użyciem buf<strong>or</strong>u<br />
oznaczyć jego pH.<br />
Surowice zawierające makroskopowo widoczne cząsteczki należy odwirować<br />
w 3000 g przez 10 minut i do testów użyć supernatantu. Osocze z hemolizą lub<br />
zanieczyszczone nie powinno być użyte. Inaktywowaną surowicę do testów<br />
należy przygotować, ogrzewającw56°C przez 30 minut. Jeśli nie zostanie zużyta<br />
w ciągu 4 godzin od inaktywacji, należy jąponownie inaktywować, ogrzewając<br />
w 56°C przez 10 minut. Wszystkie surowice przed użyciem pozostawić<br />
w temperaturze pokojowej.<br />
W rozdziale zostaną szczegółowo omówione niektóre testy serologiczne najczęściej<br />
wykonywane w lab<strong>or</strong>at<strong>or</strong>iach medycznych. Należą do nich testy do<br />
diagnostyki kiły, test Wrighta do diagnostyki brucelozy i test wykrywający<br />
antystreptolizynę O do diagnostyki późnych powikłań po zakażeniach paci<strong>or</strong>kowcowych.<br />
140
Change language