Podstawowe procedury laboratoryjne w ... - digicollection.or..

CZE˛ŚĆ I
W niektórych laboratoriach wstępna identyfikacja potwierdzana jest serologicznie
przez wykazanie obecności specyficznych polisacharydów ściany komórkowej.
Test może być przeprowadzony z użyciem klasycznej metody precypitacji lub
— szybciej — zużyciem komercyjnych przeciwciał w teście szybkiej koaglutynacji
szkiełkowej lub w teście aglutynacji lateksowej. Jeśli istnieje taka
potrzeba, β-hemolizujące paciorkowce oporne na bacytracynę można identyfikować
wykorzystując do tego celu proste testy (patrz tabela 19).
Obecność S. pyogenes w posiewie z gardła powinna zostać określona w wyniku
w sposóbpółilościowy (nieliczne, +, ++ lub +++). Masywny wzrost S. pyogenes
na całej powierzchni płytki jest charakterystyczny dla materiałów pobranych od
pacjentów z paciorkowcowym zapaleniem gardła. Hodowle od nosicieli wykazują
zwykle wzrost mniej niż 20 kolonii na płytce. Obecność nawet nielicznych kolonii
β-hemolizujących paciorkowców powinna zostać potwierdzona i zanotowana.
Tabela 19. Różnicowanie β-hemolizuja˛cych paciorkowców
Gatunki S. pyogenes S. agalactiae
E. faecalis
var. zymogenes a
Inne
Grupa Lancefield A B D C, G, F
Hemoliza β β b β β
Strefa wokółróżnicuja˛cego
+ 0 c 0 c 0 d
kra˛żka z bacytracy-
na˛
Agar z żółcia˛ i z eskulina˛ 0 0 + 0
(wzrost i zaczernienie)
Odwrotny test CAMP 0 + 0 0
Wrażliwość na kotrimoksazol
0 0 0 +
e
Test PYR f + 0 + 0
a
b
c
d
e
f
E. faecalis var. zymogenes wykazuja˛ce β-hemolizę tylko na agarze z krwia˛ końska˛.
5% niehemolizuja˛cych.
5% dodatnich.
10% dodatnich.
Kra˛żek jak w teście Kirby-Bauera.
PYR: pirolidonylo-β-naftylamid.
Hodowla Corynebacterium diphtheriae
Mimo że maczugowiec błonicy dobrze rośnie na zwykłym agarze z krwią, lepszy
wzrost uzyskuje się przy posiewie na jedno z dwóch specjalnych podłoży:
• Skoagulowana surowica Löfflera lub podłoże jajeczne Dorseta. Jakkolwiek
nieselektywne, obydwa te podłoża umożliwiają obfity wzrost maczugowca
błonicy po jednodniowej inkubacji. Ponadto morfologia komórek jest bardziej
,,typowa’’: nieregularnie wybarwione, krótkie lub długie, lekko zakrzywione
pałeczki wykazujące metachromatyczne ziarnistości i ułożone w kształt V lub
równoległych palisad. Metachromatyczne ziarnistości są wyraźniej widoczne
po wybarwieniu błękitem metylenowym lub barwieniu Alberta niż po zabarwieniu
metodą Grama.
• Selektywny agar tellurynowy z krwia˛. Podłoże to ułatwia izolację, jeśli
maczugowce są nieliczne, jak np. w przypadku nosicieli. Na tym podłożu
kolonie maczugowców błonicy są szarawe lub czarne, a pełny wzrost pojawia
się po 48 godzinach. Charakterystyczne kolonie, zawierające w preparacie
barwionym metodą Grama pałeczki o morfologii podobnej do maczugowców,
należy przesiać na płytkę z agarem z krwią i określić ich czystość oraz
77