24.10.2014 Views

Podstawowe procedury laboratoryjne w ... - digicollection.or..

Podstawowe procedury laboratoryjne w ... - digicollection.or..

Podstawowe procedury laboratoryjne w ... - digicollection.or..

SHOW MORE
SHOW LESS

You also want an ePaper? Increase the reach of your titles

YUMPU automatically turns print PDFs into web optimized ePapers that Google loves.

OZNACZANIE WRAŻLIWOŚCI NA ANTYBIOTYKI<br />

Kontrola jakości<br />

Potrzeba kontroli jakości testu<br />

lekowrażliwości<br />

Na końcowy wynik testu dyfuzyjno-krążkowego wpływa duża liczba zmiennych.<br />

Niektóre z nich, takie jak gęstość inoculum i temperatura inkubacji, łatwo<br />

kontrolować, jednak lab<strong>or</strong>at<strong>or</strong>ium rzadko znany jest dokładny skład podłoża<br />

komercyjnego lub różnice w jakości kolejnych serii. Lab<strong>or</strong>at<strong>or</strong>ium nie może<br />

również odpowiadać za zawartość antybiotyków w krążkach. Wyniki testów<br />

muszą być ciągle monit<strong>or</strong>owane w programie kontroli jakości, który należy<br />

traktować jako element <strong>procedury</strong>.<br />

Precyzja i dokładność metody powinny być kontrolowane przez równoległe<br />

wykonywanie testów dla szczepu kontrolnego o znanej lekowrażliwości. Szczepy<br />

kontrolne i badane drobnoustroje podlegają tej samej procedurze. Uzyskane dla<br />

mikro<strong>or</strong>ganizmów kontrolnych wielkości stref powinny odpowiadać wartościom<br />

przedstawionym w tabeli 24. Powtarzające się uzyskiwanie wyników, które nie<br />

mieszczą się w określonym zakresie, jest przypuszczalnie efektem błędu<br />

technicznego lub użycia niewłaściwych odczynników. Należy sprawdzić każdy<br />

odczynnik i etap testu, odnaleźć i wyeliminować błąd.<br />

Standardowa procedura kontroli jakości<br />

Program kontroli jakości polega na równoległym prowadzeniu oznaczania<br />

wrażliwości dla szczepów kontrolnych i badanych. Kontrole należy przeprowadzać<br />

co tydzień lub dla co piątej serii badań i — dodatkowo — przy każdej<br />

nowej partii agaru Mueller-Hintona lub krążków.<br />

Standardowe szczepy do kontroli jakości<br />

Staphylococcus aureus (ATCC 25923)<br />

Escherichia coli (ATCC 25922)<br />

Pseudomonas aeruginosa (ATCC 27853)<br />

Powyższe szczepy można uzyskać z państwowych kolekcji szczepów. Są także<br />

dostępne komercyjnie w f<strong>or</strong>mie liofilizowanej uzyskanej z czystych hodowli.<br />

Hodowle szczepów wz<strong>or</strong>cowych do codziennego użytku powinny być prowadzone<br />

na skosach lub agarze odżywczym (zalecany jest agar tryptozowo-sojowy)<br />

i przechowywane w chłodziarce. Co 2 tygodnie należy przesiewać hodowle na<br />

świeże skosy.<br />

Przygotowanie inoculum<br />

Hodowle można zakładać na każdym podłożu płynnym i inkubować do chwili<br />

zmętnienia bulionu. Z każdego podłożapłynnego należy przesiać szczep na płytkę<br />

agarową i inkubować przez noc. Następnie pobrać pojedyncze kolonie i przeprowadzić<br />

badanie wrażliwości w sposób opisany na stronach 127 – 130.<br />

136

Hooray! Your file is uploaded and ready to be published.

Saved successfully!

Ooh no, something went wrong!