Podstawowe procedury laboratoryjne w ... - digicollection.or..
Podstawowe procedury laboratoryjne w ... - digicollection.or..
Podstawowe procedury laboratoryjne w ... - digicollection.or..
You also want an ePaper? Increase the reach of your titles
YUMPU automatically turns print PDFs into web optimized ePapers that Google loves.
OZNACZANIE WRAŻLIWOŚCI NA ANTYBIOTYKI<br />
Kontrola jakości<br />
Potrzeba kontroli jakości testu<br />
lekowrażliwości<br />
Na końcowy wynik testu dyfuzyjno-krążkowego wpływa duża liczba zmiennych.<br />
Niektóre z nich, takie jak gęstość inoculum i temperatura inkubacji, łatwo<br />
kontrolować, jednak lab<strong>or</strong>at<strong>or</strong>ium rzadko znany jest dokładny skład podłoża<br />
komercyjnego lub różnice w jakości kolejnych serii. Lab<strong>or</strong>at<strong>or</strong>ium nie może<br />
również odpowiadać za zawartość antybiotyków w krążkach. Wyniki testów<br />
muszą być ciągle monit<strong>or</strong>owane w programie kontroli jakości, który należy<br />
traktować jako element <strong>procedury</strong>.<br />
Precyzja i dokładność metody powinny być kontrolowane przez równoległe<br />
wykonywanie testów dla szczepu kontrolnego o znanej lekowrażliwości. Szczepy<br />
kontrolne i badane drobnoustroje podlegają tej samej procedurze. Uzyskane dla<br />
mikro<strong>or</strong>ganizmów kontrolnych wielkości stref powinny odpowiadać wartościom<br />
przedstawionym w tabeli 24. Powtarzające się uzyskiwanie wyników, które nie<br />
mieszczą się w określonym zakresie, jest przypuszczalnie efektem błędu<br />
technicznego lub użycia niewłaściwych odczynników. Należy sprawdzić każdy<br />
odczynnik i etap testu, odnaleźć i wyeliminować błąd.<br />
Standardowa procedura kontroli jakości<br />
Program kontroli jakości polega na równoległym prowadzeniu oznaczania<br />
wrażliwości dla szczepów kontrolnych i badanych. Kontrole należy przeprowadzać<br />
co tydzień lub dla co piątej serii badań i — dodatkowo — przy każdej<br />
nowej partii agaru Mueller-Hintona lub krążków.<br />
Standardowe szczepy do kontroli jakości<br />
Staphylococcus aureus (ATCC 25923)<br />
Escherichia coli (ATCC 25922)<br />
Pseudomonas aeruginosa (ATCC 27853)<br />
Powyższe szczepy można uzyskać z państwowych kolekcji szczepów. Są także<br />
dostępne komercyjnie w f<strong>or</strong>mie liofilizowanej uzyskanej z czystych hodowli.<br />
Hodowle szczepów wz<strong>or</strong>cowych do codziennego użytku powinny być prowadzone<br />
na skosach lub agarze odżywczym (zalecany jest agar tryptozowo-sojowy)<br />
i przechowywane w chłodziarce. Co 2 tygodnie należy przesiewać hodowle na<br />
świeże skosy.<br />
Przygotowanie inoculum<br />
Hodowle można zakładać na każdym podłożu płynnym i inkubować do chwili<br />
zmętnienia bulionu. Z każdego podłożapłynnego należy przesiać szczep na płytkę<br />
agarową i inkubować przez noc. Następnie pobrać pojedyncze kolonie i przeprowadzić<br />
badanie wrażliwości w sposób opisany na stronach 127 – 130.<br />
136