Immobilisierung

Ergebnisse und Diskussion
gene erneut zu reduzieren. Dadurch ergibt sich ein konstanter Strom an Elektronen von dem
Substrat über das Enzym und von da aus durch die Viologene zu der Elektrode. Durch die
Gewissheit, dass das FNR – Enzym an die Dendrimeroberflächen bindet kann die ZV als weiteres
Werkzeug verwendet werden, um die Bindung zwischen diesen Beiden zu bestätigen.
Zusätzlich geben diese Experimente auch Aufschluss darüber, ob die Dendrimere als geeignete
Immobilisierungsmatrix für Enzyme geeignet sind. Hierfür müssen zwei Voraussetzungen
erfüllt sein, die Assoziation der Enzyme in ihrer nativen Form, damit sie Reaktionen katalysieren
können, und der Transport der Elektronen von dem aktiven Zentrum zu der Elektrodenoberfläche.
Die Ergebnisse dieser Experimente werden auf den nächsten Seiten beschrieben
4.3.2.2 Die qualitative Anbindung der Enzyme an Dendrimeroberflächen
Die vorbereiteten Elektroden 14 werden in den Messaufbau eingesetzt und mittels zyklischer
Voltametrie untersucht. Wird eine Messung mit der vollständig aufgebauten Oberfläche
in Phosphatpuffer ohne Substrat betrachtet, sollte nur das reversible Signal der Viologene
aufgezeichnet werden. Im nächsten Schritt, nach der NADPH Zugabe, sollte sich die aufgezeichnete
Strom – Spannungskurve ändern, insofern es einen Elektronentransfer von dem
Enzym über die Viologengruppen zu der Elektrode gibt. In Abbildung 47 links ist der Vergleich
zwischen einer Messung mit und ohne NADPH zu sehen. Die schwarze Linie zeigt den
Hintergrund, in dem nur ein Signal von den Viologenen bei E 0 = -0.46 V erscheint. Das Enzym
selber ist in diesem elektrochemischen Fenster nicht zu detektieren. Nach Zugabe des
NADPHs zu dem Leitelektrolyten und erneutem Messen verändert sich das detektierte Signal.
Zwar ist das Enzym an sich immer noch nicht elektrochemisch adressierbar, aber es erzeugt
Elektronen aus der Reaktion mit dem Substrat. Somit wird eine erfolgreiche Anbindung des
Enzyms qualitativ bestätigt.
14 Ohne KNO 3 in der Inkubations- und Messlösung
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