Immobilisierung

Ergebnisse und Diskussion
NADPH NADP + +H + -0,2 -0,1 0,0
Dendrimerfilm
2 e -
Goldelektrode
i [µA]
1,2
1,0
0,8
0,6
0,4
0,2
ZV zur Enzymanbindung
0,0
-0,2
-0,4
E [V vs Ag/AgCl]
0 2000 4000
t [s]
Abbildung 48: ZV's und zeitliche Projektion des Stroms während der Enzymanbindung.
Links ist eine schematische Darstellung der ablaufenden Reaktion vor der Elektrode. In der Mitte ist die Strom –
Spannungskurve während der Anbindung der 4 his – FNR an die Dendrimermatrix. Rechts ist die Auftragung des
Stroms bei -0.2 V gegen die Zeit. Die ZVs wurden mit 5 mV/s aufgenommen, in 5 mM NADPH, 0.1 M KNO 3 ,
0.05 M PB, pH 7.5.
In einem weiteren Experiment (Abbildung 48) wurde das Enzym zusammen mit seinem
Substrat zu der vollständig aufgebauten Dendrimeroberfläche gegeben. Während der Adsorption
konnten von den Enzymen, die sich in der Nähe der leitfähigen Matrix aufhielten, die
durch bioelektrokatalytische Reaktion entstandenen Elektronen abgeleitet werden. Somit kann
ein Rückschluss auf die Assoziation der Enzyme an die Oberfläche gezogen werden, da der
Strom immer größer wird. Deshalb müssen immer mehr Enzyme an der Phasengrenze sein
und liegen nicht homogen in der Lösung verteilt vor. Zwischen den Enzymen und der
Dendrimermatrix muss eine Bindung aufgebaut worden sein.
Dieser Versuch zeigt ein analoges Verhalten zu den SPR Untersuchungen, die bereits vorgestellt
wurden, und bestätigt die erfolgreiche Assoziation der Enzyme an die Oberfläche.
Zusätzlich zeigt es die große Stabilität des Enzyms, da die Reaktion über eine Stunde andauerte
und sich nur langsam ein Plateau abzeichnet.
Mit diesem Experiment wurden zwei Dinge gezeigt, zum einen wurde eine schnelle Alternative
zu den SPR – Experimenten gefunden. Zum anderen konnte eruiert werden, dass es
möglich ist die freigesetzten Elektronen aus der enzymatisch katalysierten Reaktion über die
Viologene zur der Elektrode zu transportieren. Durch Kontrollexperimente, die im nächsten
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