Immobilisierung

Ergebnisse und Diskussion
Tabelle 5: Steigung der Dissoziationsphase. Bei der 4-his FNR konnte zu Beginn und am Ende der Messung näherungsweise
Linearität der Messwerte angenommen und die Steigung bestimmt werden. Bei der 2-his FNR was das
nur am Ende möglich.
Steigung der 4-his FNR 2-his FNR
Dissoziation
Anfang -67.57 ---
Ende -28.16 -29.59
Anhand der Tabelle 5 kann ein Vergleich zu den vorhergehenden Messungen gezogen
werden. Die 4-his FNR zeigt etwas schlechtere Werte. Im Gegensatz dazu weißt die 2-his
FNR stabilere Werte nach sechs Stunden auf als in dem Experiment mit drei Stunden Assoziationsphase.
Der gemessene Wert für die Winkeländerung ist hier 155 m°, was etwa gleich
ist mit dem Wert weiter oben. Die Steigung ist allerdings deutlich niedriger als oben, was auf
eine stabilere Bindung schließen lässt. Im Vergleich kann festgehalten werden, dass die erste
Variante für die 4-his FNR bessere Werte aufweist, was auf eine optimale Reorganisierung
der Enzyme auf der Oberfläche während der Assoziation schließen lässt. Im Gegensatz dazu
führt die Reorganisierung bei der 2-his FNR zu einer Reduzierung der Bindungseigenschaften
der Oberfläche. Der Steigung zufolge, die im ersten Experiment etwa das Doppelte der 4-his
aufweist, liegt sie im zweiten Experiment nahezu gleichauf mit der Steigung der 4-his FNR.
Daraus kann geschlussfolgert werden, dass sich für die 4-his FNR eine lange Assoziationsphase
zur Reorganisation der Enzyme besser eignet, als eine kurze. Die Enzyme sind so in
der Lage über Hin- und Rückbindungen einen optimalen Abstand zueinander zu erreichen,
was in einer optimalen Oberflächenkonzentration resultiert. Die 2-his FNR sollte lediglich
kurz assoziiert werden, da andernfalls zu viele Bindungsstellen wegfallen. Zwar können damit
nicht die gleichen hohen Bedeckungen erreicht werden wie mit der 4-his FNR, aber der Film
ist stabiler als bei langen Assoziationszeiten.
Als nächstes werden elektrochemische Untersuchungen zur Anbindung und Dissoziation
des Enzyms an die Oberfläche untersucht. Dabei wird zwischen einer Kurzen und einer langen
Zeitskala unterschieden.
4.1.3.3 Elektrochemische Untersuchungen
Bislang wurde hinreichend mit spektroskopischen Methoden gezeigt, dass sich bei Zugabe
einer Enzymlösung ein Film vor der Sensoroberfläche anlagert, der bei der 4-his FNR stabiler
ist als bei dem wt und der 2-his FNR. Im letzten Teil des Kapitels werden wir uns der Frage
widmen ob der angelagerte Film auch eine katalytische Aktivität aufweist. Für die entspre-
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