Immobilisierung

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Ergebnisse und Diskussion denoberfläche immobilisiert werden konnte. Im nächsten Schritt muss darüber nachgedacht werden wie die Enzymanbindung nachgewiesen werden kann. Dafür kann indirekt über die enzymatisch katalysierte Reaktion der Beweis einer erfolgreichen <strong>Immobilisierung</strong> erbracht werden, wenn nach der Assoziations- und Dissoziationsphase immer noch eine katalytische Reaktion detektiert werden kann. Die nachgewiesenen Elektronen können in dem Falle nur von dem Enzym kommen, welches das zugegebene Substrat umsetzt. Die vorgegebene Reaktion, die dabei abläuft ist die Umsetzung von NADPH zu NADP + und einem Elektron, analog Gleichung ( 2 ). 1 ⇌ * + ( 2 ) Dabei werden in einem zweiten Schritt die Elektronen von einem Redoxmediator eingesammelt und zu der Elektrode transportiert. An der Elektrodenoberfläche werden die Elektronen dann entsprechend der angelegten Spannung detektiert. Das folgende Kapitel wird die Gesichtspunkte der einzelnen Teilreaktionen kurz anreißen, die nötig sind die globale Reaktionskinetik aufzustellen, sowie die einzelnen Experimente vorstellen, die durchgeführt wurden, um die Reaktionskinetiken für die verschiedenen Enzyme, die im Laufe dieser Arbeit verwendet wurden, aufzustellen und deren Aktivität vergleichen. 4.1.2 Kinetiken zu enzymatisch katalysierten Reaktionen [1–4] Die allgemeine Form einer enzymatisch katalysierten Reaktion ist in Gleichung ( 3 ) gegeben und nachfolgend mit der bioelektrochemischen Reaktion konkretisiert, die im Laufe der Arbeit zur Bestimmung der Kinetikkonstanten verwendet wird [54] E + S → E + P ( 3 ) Wobei sich diese einfach aussehende Reaktionsgleichung aus einer größeren Anzahl von Teilgleichungen zusammensetzt und im Folgenden nur als globale Reaktionsgleichung be- 30
Ergebnisse und Diskussion zeichnet wird. Werden die einzelnen Teile der Reaktion betrachtet, können auch verschiedene Teilgleichungen aufgestellt werden. E 5$ + S 6 ⇄ 6 8E 5$ S9 ( 4 ) 8E 5$ S9 : ; → 8E
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