Immobilisierung

Ergebnisse und Diskussion
chenden Experimente wird die 4-his FNR wie oben besprochen an eine gereinigte und modifizierte
Goldelektrode gebunden. Im nächsten Schritt wird die beladene Elektrode in eine
elektrochemische Zelle eingebracht und das Signal in Abhängigkeit des Substrats gemessen.
Die wirkenden Mechanismen sind wieder die gleichen, die auch weiter oben in Kapitel 4.1.2
schon bemüht wurden. Wie bereits angekündigt werden als erstes die Langzeitmessungen
präsentiert, damit das vorherige Kapitel abgeschlossen werden kann. Dabei wurden zwei Unterschiedliche
Fälle betrachtet. Zum einen die Aktivität des Enzyms wenn es arbeitet. Dabei
wird von der Chronoamperometrie Gebrauch gemacht, die eine konstante Spannung über einen
gewünschten Zeitraum zwischen zwei Elektroden anlegt. Zum anderen werden in eintägigen
Abständen ZV’s gemessen, um die Haltbarkeit der Enzymschicht vor der Elektrode zu
testen.
4.1.3.3.1 Langzeitmessungen des Enzyms an Oberflächen
Analog zu den bereits gemessenen Sensorgrammen wird der gemessene Strom gegen die
Zeit aufgetragen. Das Experiment findet in einem Milliliter 0.1 M PB, pH 7.5, mit 50 µM
Ferrocenmethanol und 2 mM NADPH unter Schutzgasatmosphäre statt. Die Lösung wird
kontinuierlich gerührt, weshalb das Signal etwas rauscht.
In Abbildung 21 ist die entsprechende Messung zu sehen. Der Strom sinkt in den ersten
Minuten stärker ab, aber verläuft dann mit einer leichten negativen Steigung über den gesamten
Zeitraum stabil. Somit kann anhand dieser Messungen eine gute Übereinkunft zu den SPR
– Messugen gezogen werden, die sehr ähnlich verlaufen. Werden die chronoamperometrischen
und SPR spektroskopischen Messungen normiert und überlagert, erkennt man, dass das
aktive Signal nicht viel schneller fällt als das statische Signal. Somit kann auch aus den elektrochemischen
Messungen eine Aussage über die Stabilität des Enzyms auf der Oberfläche
getroffen werden. Diese Antwort ist insofern noch interessanter, da das gemessene Signal
auch zeigt, dass das Enzym stabil ist und die bioelektrokatalytische Reaktion erfolgreich betreiben
kann. Zudem ist es genau vor der Sensoroberfläche lokalisiert, was für den Mediator
einen besonders kurzen Weg zwischen dem aktiven Zentrum und der Elektrode bedeutet.
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