Immobilisierung

Ergebnisse und Diskussion
Das nächste Enzym, welches auf der inaktiven Oberfläche untersucht wird ist die 2 – his
FNR, die in ihrer Peripherie zwei zusätzliche Histidine trägt. Damit ist es möglich an eine
modifizierte Oberfläche zu binden, wie es auch in den Messungen in Kapitel 4.1 gezeigt wurde.
In Abbildung 50 ist die entsprechende Messung in der Mitte zu sehen. Nach Zugabe des
NADPH zu dem Elektrolyten sollte sich bei einer erfolgreichen Immobilisierung des Enzyms
ein katalytischer Strom zeigen. Doch in der zweiten Messung (rote Linie) ist kein Unterschied
zu der Hintergrundmessung zu erkennen. Wie in der vorhergehenden Messung kann auch hier
eine Assoziation des Enzyms an die Oberfläche ausgeschlossen werden. Aus Kapitel 4.1 ist
bekannt, dass es zu einer Anlagerung des 2 – his FNR Enzyms kommt, solange es eine hohe
Konzentration an freiem Enzym in der Inkubationslösung gibt, die im Gleichgewicht mit der
gebundenen Spezies steht. Nachdem die Elektrode gespült wurde, dissoziiert ein Großteil des
Enzyms von der Elektrode weg, weshalb die Oberflächenkonzentration an Enzym zu gering
sein, bzw. gegen null konvergieren wird, als das ein Signal detektiert werden könnte.
Im letzten Schritt wird untersucht, ob das 4 – his FNR Enzym an die unvollständige Matrix
bindet. Analog zu den vorhergehenden Messungen und den Erfahrungen der anderen Enzyme
sollte auch in diesem Fall kein Bindungsereignis eintreten. In Abbildung 50 sind die
entsprechenden Messungen auf der rechten Seite abgebildet und es ist kein katalytischer
Strom nach der Zugabe von NADPH zu sehen. Die Erklärung ist analog zu der 2 his – FNR.
Der Mechanismus der Bindungsbildung ist damit zwingend an die Übergangsmetallionen
gebunden.
Alle drei Enzyme wurden auf der Dendrimermatrix ohne das Nickelkation untersucht und
bei allen Messungen wurde immer dasselbe Ergebnis erhalten. Keines der Enzyme bindet an
den reinen Dendrimeren solange keine Metallkationen mit freien Bindungsstellen vorhanden
sind. Daraus kann geschlossen werden, dass die Metallkationen ein essentieller Bestandteil
bei dem Aufbau der Immobilisierungsmatrix sind und die Theorie über die Bindung zwischen
dem Enzym und dem Dendrimer gestärkt werden.
4.3.2.3.2 Vergleich der verschiedenen Enzyme auf der Dendrimermatrix
Analog zu der vorhergehenden Messreihe wird wieder mit dem wildtypischen Enzym angefangen
und danach mit steigender Zahl der eingefügten Histidine weitergearbeitet. Die einzelnen
Untersuchungen werden mit ZV gemacht.
Für das wildtypische Enzym konnte das vorhergesagte Bindungsverhalten bestätigt werden.
In Abbildung 51 kann in der Kontrollmessung mit NADPH nur die Redoxwelle der Vio-
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