Immobilisierung

Ergebnisse und Diskussion
stabilerer Komplex bilden, der ein potentieller Kandidat für das angestrebte Ankermolekül ist.
Zusammenfassend für die Synthesestrategie [3] wird also auf der einen Seite eine Thiolfunktion
und auf der anderen eine NTA oder TACN – Funktion benötigt. Es stellte sich heraus, dass
eine Verbindung aus der Liponsäure mit dem N α , N α -Biscarboxymethyllysin am einfachsten
zu realisieren ist, wie in Abbildung 9 zu sehen.
4.1.1.1 NTA funktionalisierte Oberflächen
Die Synthese des NTA – Ankermoleküls ist bereits in der Literatur bekannt und von Limoges
et. al. beschrieben [3] . Aus diesem Grund wurden für die Synthese keine Probleme erwartet,
was effektiv nicht der Fall war, sondern einige Probleme mit sich brachte, die im Laufe
der Beschreibung der Synthese erläutert werden sollen.
Im ersten Schritt der Synthese zur Darstellung des Ankermoleküls, der Aktivierung der
Liponsäure, gab es keine weiteren Schwierigkeiten. In die Reaktionsmischung wird erst die zu
aktivierende organische Säure zusammen mit dem Succinimid vorgelegt und in der Kälte
langsam das reaktive Agens, Dicyclohexylcarbodiimid, zugegeben. Nach einer ersten Phase
von drei Stunden, in der weiter bei 0 °C gerührt wird, und einer zweiten Phase von 24 Stunden
in der bei Raumtemperatur gerührt wird, wird das Rohprodukt abfiltriert und in Aceton/Hexan
umkristallisiert, um ein gelbes fein kristallines Pulver mit knapp 70 % Ausbeute zu
erhalten.
In der zweiten Synthesestufe ergaben sich einige Probleme, die erst behoben werden
mussten und ein Abweichen von der Originalvorschrift erforderten. Erstens wurde die gesamte
Vorschrift unter standard Schlenktechnik durchgeführt, was einen weiteren Trockenschritt
aller Reagenzien beinhaltet. Zweitens wurde das Lösemittel gewechselt und die Synthese in
DMSO bei 100 °C durchgeführt. Die wichtigste Änderung in der Vorschrift, die letztendlich
den erwünschten Erfolg brachte, war die richtige Betrachtung des pH – Wertes.
Im ersten Schritt werden die festen Edukte im Vollvakuum bei 70 °C vorgetrocknet, sofern
das möglich ist, und das Triethylamin unter Argonatmosphäre destilliert, bzw. gelagert.
Das N α , N α – bis(carboxymethyl) – lysin wird in trockenem DMSO gelöst und anschließend
das frisch destillierte Trimethylamin zugegeben, wobei ein weißer viskoser Feststoff entsteht.
Zuletzt wird das N – (lipoyloxy)succinimid zugegeben und die gesamte Reaktionsmischung
zehn Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Nachdem mittels Massenspektrometrie die vollständige
Umsetzung festgestellt wurde, kann das Lösemittel im Vakuum entfernt und der verbleibende
klebrige Feststoff im Exsikkator (NaOH) vollständig getrocknet werden. Danach
27