Immobilisierung

Ergebnisse und Diskussion
300
250
Winkeländerung [m°]
200
150
100
50
0
-50
-50 0 50 100 150 200 250 300 350
Zeit [min]
Abbildung 54: Vergleichender kinetischer Plot des NTA – Viologen Dendrimers 1.
Es wurde mit 500 nM 4 his – FNR in 0.5 M PB, pH 7.5 inkubiert. Bei zwei Messungen wurde das Enzym zwei
Stunden inkubiert und bei einer Messung eine Stunde, wobei die fehlende Stunde zu der Dissoziation hinzugefügt
wurde.
Der Sprung des Signals bei dem Wechsel des Puffers kann durch die kurze Zeit kommen,
in der die Oberfläche nicht unter Solvens stand sondern lediglich benetzt war und es zu einem
Zusammenschrumpfen der gesamten Oberflächenkonstruktion, also dem Dendrimer mit dem
Enzym, kam. Dieser Effekt kann allerdings nicht sehr groß sein, da das Signal nur um wenige
m° schwankt. Die ermittelten Werte aus den Experimenten für eine Oberflächenbedeckung
mit dem Enzym liegen bei 204 bzw. 233 m°. Ein Endwert für die Dissoziation kann nicht angegeben
werden, da die thermische Drift bei den Experimenten zu groß ist. Die Anbindung
des FNR Enzyms an das dritte NTA – Viologen Dendrimer zeigt, wie erwartet, einen schnellen
Anstieg nach der Zugabe des Enzyms, die dann in eine langsamere, aber konstante Zunahme
des Signals läuft (Abbildung 56). Dabei werden sehr hohe Werte für die Assoziation
von über 300 m° gemessen. Ein so hoher Wert wurde aufgrund der schlechten Modifizierung
allerdings nicht erwartet. Ein Grund für diesen deutlich höheren Wert kann in der Größe des
Dendrimers liegen, da ein kleinerer Durchmesser angenommen werden kann und dadurch ist
das Enzym näher an der Oberfläche gebunden ist. Somit wird der Brechungsindex stärker
beeinflusst.
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