Immobilisierung

Ergebnisse und Diskussion
lung. Durch die stärkere Bindung kommt es zu einer höheren Bedeckung der Oberfläche mit
dem Enzym, die Oberfläche bleibt intakt, da kaum Metall aus den Chelatliganden entfernt
werden kann. Dieser Metallionentransfer (MIT) vom NTA zu den his – X 3 – his Funktionen
wurde auch schon in der Fachliteratur beobachtet.
Das nächste Kapitel ist eine Erweiterung der Dissoziationskonstanten, die die Abnahme
der Enzymkonzentration über die Dauer des Experiments mit einbezieht. Ein beachtlicher Teil
der Enzyme wird durch die Assoziation aus der Lösung entfernt, aber für die Bestimmung der
K D Werte wird immer mit der Anfangskonzentration gerechnet, was zu einer Verfälschung
führt, die je nach Bedeckung und Gewicht des Enzyms erheblich sein kann.
4.1.3.2.2 Einflüsse durch die Verarmung der Messlösung an Enzym
Zunächst wird für die Korrektur des K D – Wertes Gleichung ( 12 ) eingeführt. Dabei ist
die Grundlage der Berechnung die Subtraktion der assoziierten Spezies von der Anfangskonzentration.
Das Signal wird dabei in Abhängigkeit von dem Volumen, der Sensoroberfläche
und einem Faktor zur Umrechnung von m° in mol/L verrechnet.
Das Signal im Gleichgewicht (R eq in m°) ist proportional zu der Masse an gebundenem
Analyten (122 bei der vorliegenden Messeinheit Autolab Twingle) und der Oberfläche (S in
mm 2 ) des Sensors. Unter Zuhilfenahme der Masse des Analyten und des Volumens der Messzelle,
kann Gleichung ( 12 ) die Verarmung an freiem Analyten, bzw. FNR Enzym, berechnen.
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