Immobilisierung

Ergebnisse und Diskussion
K D 2-his < K D 4-his zu erwarten. Dies bedeutet, dass das Gleichgewicht der 4-his FNR mehr auf
der dissoziierten Seite liegt als bei der 2-his FNR, bzw. sich das Gleichgewicht langsamer
einstellen wird.
Als erstes wird die 2-his FNR betrachtet, deren gefittete Messungen zusammen mit der
Projektion der maximalen Winkeländerung gegen die Konzentration in Abbildung 14 dargestellt
sind. Es ist in den ersten Messungen ein sehr steiler Anstieg zu sehen, der für diese Art
von Reaktion charakteristisch ist. Dies ist in der Tatsache begründet, dass die Oberfläche viele
freie Plätze hat und die Enzyme sich schnell anlagern können, ohne gegenseitige Wechselwirkung
zu spüren. Diese Wechselwirkungen sind es, die ein Abflache der Kurve verursachen
und schließlich in die maximale Bedeckung laufen.
400
Winkeländerung [m°]
300
200
100
0
0 500 1000 1500
t [s]
0 200 400 600 800 1000
Konzentration [nM]
Abbildung 14: Gefittete Messreihen und konzentrationsabhängige Projektion der Maximalbedeckung an 2 his –
FNR.
Links die gefitteten Messreihen, rechts ist der maximale Wert gegen die Konzentration projeziert und die Langmuir
– Isotherme durch die Punkte gelegt. Gemessen wurde in 50 mM PB, pH 7.5, in einer 35 µL Messzelle, Oberfläche
6 mm 2 , Konzentration an Enzym 12.5 nM (schwarz), 25 nM (rot), 50 nM (blau), 100 nM (pink) und 1000 nM
(oliv).
Sowohl bei den simulierten Kurven, als auch bei der daraus extrahierten Auftragung gegen
die Konzentration kann bei den ersten vier Messpunkten nahezu eine Gerade durch die
Punkte gelegt werden, was in diesem Bereich durchaus berechtigt ist. Bei niedrigen Konzentrationen,
wenn der variable Reaktionspartner nicht durch den anderen limitiert wird, kommt
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