Immobilisierung

Ergebnisse und Diskussion
Tabelle 6: Vergleich der Kinetikkonstanten der 4 his – FNR im gebundenen Zustand und in Lösung.
4-his K M / µM k 2 / s -1 k 3 /(M*s) -1 k red
in Lösung
340 ± 40 195.65 ± 19.86 3.07E+06 ± 2.11E+05 580.44
auf der Elektrode gebunden
3160 ± 800 241 ± 75 4,42E+06 ± 0.1
Oberflächenbedeckung/ pmol*cm -2 = Γ FNR = 19.3 ± 7
4.1.3.4 Switch sense
Als letzten Teil der Arbeiten mit dem Enzym werden die Experimente mit Switch sense
vorgestellt, die in Kooperation mit Uli Rant von der TU München durchgeführt wurden. Alle
Abbildungen und Ergebnisse in diesem Abschnitt wurden von der AG Rant erstellt und hier
zur Verfügung gestellt.
Switch sense ist eine sehr junge Technologie mit der verschiedene kinetische Informationen
aus einem einzigen Experiment gezogen werden können. Aus diesem Grund werden die
Grundzüge hier kurz umrissen. In Abbildung 27 ist das Grundprinzip von Switch sense zu
sehen.
Abbildung 27: Grundprinzip von Switch sense; ohne Analyt
Im unteren Teil ist eine oszillierende Rechteckspannung zu sehen, die gegen die Zeit aufgetragen
ist. Durch diese Spannung wird eine Elektrode polarisiert, die einen DNS – Strang
anziehen oder abstoßen kann. An diesem DNS Strang sitzt ein Fluoreszenzmarker, der ein
Signal emittiert, je weiter er von der Elektrodenoberfläche entfernt ist, da diese mit einem
Quencher modifiziert ist. Im normalen Zustand geht diese auf – und ab Bewegung sehr
schnell, da an der DNS keine größeren Moleküle sind, die die Bewegung verhindern können.
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