Immobilisierung

Ergebnisse und Diskussion
Grundlage für die Bindungskinetiken ist die Langmuir – Isotherme, die die entsprechenden
Werte liefert. Die Dissoziationskonstante ist dabei, analog zu der Kinetik der Enzyme, die
halbmaximale Konzentration der ermittelten Maximalkonzentration. Im Laufe der Experimente
wird sich zeigen, dass die oben getroffenen Annahmen zur Verwendung der Langmuir –
Isotherme hier nicht mehr gelten wird. Dies wird nach der Präsentation der ersten Ergebnisse
diskutiert.
4.1.3.2.1 Die Bestimmung der Oberflächenkonzentration und der Dissoziationskonstanten
Zuerst werden die Messungen der beiden unterschiedlichen FNR Mutanten miteinander
verglichen, was in Abbildung 13 zu sehen ist. Bereits ohne jegliche Bemühung einer mathematischen
Betrachtung kann ein deutlicher Unterschied in dem Assoziations- und Dissoziationsverhalten
ausgemacht werden.
700
600
Winkeländerung [m°]
500
400
300
200
100
0
-100
4-his FNR
2-his FNR
0 500 1000 1500 2000 2500 0 500 1000 1500 2000 2500
Zeit [s]
Abbildung 13: Messungen zur Bestimmung der Dissoziationskonstanten K D .
Auf der linken Seite ist die Messreihe, die mit der 4-his FNR durchgeführt wurde und auf der rechten Seite entsprechend
die Messreihe der 2-his FNR. Alle Messungen wurde in 0.1 M PB, pH 7.5,durchgeführt. Die Enzymkonzentrationen
sind 12.5 nM (schwarz), 25 nM(rot), 50 nM (blau), 100 nM (pink), 200 nM (oliv), 500 nM (lila), 1000 nM
(purpur).
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