Immobilisierung

Ergebnisse und Diskussion
1600
Winkeländerung [m°]
1200
800
400
0
-1 0 1 2 3 4 5 6 7
Zeit [h]
Abbildung 19: Anbindung der 2- und 4 his – FNR an eine Nickel – NTA Oberfläche.
Die Messungen zeigen, wie sich die Enzyme (schwarze Linie 2 his und rote Linie 4 his – FNR) an der Sensoroberfläche
anlagern und danach wieder dissoziieren, wobei die 4-his FNR eine deutlich höhere Stabilität aufweist als die 2-
his FNR. Gemessen wurde in 0.1 M PB, pH 7.5, einer 35 µL Messzelle, Oberfläche 6 mm 2 und 500 nM Enzym.
Bei der 4-his FNR sieht es anders aus; das Maximum ist später und geringer ausgeprägt
als bei der 2-his FNR, dafür fällt auch in der Assoziationsphase das Signal nicht annähernd so
stark, noch bricht es bei dem Wechsel zu der Dissoziationsphase ein. Es erfolgt sogar eine
leichte Stabilisierung auf, da die Steigung, wird in der letzten halben Stunde der Assoziationsphase
eine Tangente extrapoliert und mit der Dissoziationsphase, die näherungsweise als
Gerade interpretiert werden kann, verglichen, einen leicht positiveren Wert aufweist.
Tabelle 4 gibt die Werte der Steigung am Ende der Assoziation und Dissoziation der Messung an. Dabei wurden
die Messwerte in der letzten Stunde näherungsweise als linear interpretiert die Steigung bestimmt.
Steigung/ m°/h 4-his FNR 2-his FNR
Assoziation -53.80 -101.18
Dissoziation -23.50 -44.12
Beide Systeme hatten in dieser Betrachtung genug Zeit sich auf der Oberfläche richtig zu
orientieren, bzw. sich anzuordnen. Es stellt sich die Frage ob es bei den Enzymen eine Art der
Optimierung auf der Oberfläche gibt, die dazu führt, dass sich ein Assoziationsoptimum
ergibt. Die Anlagerung nach drei Stunden, wird dabei als das erste Extrem mit ausreichend
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