PROGRAMA PDF - Grupo de Pesquisa em Pré-Processamento de ...

econstituído
III. MATERIALES Y MÉTODOS
Fuente: Morales L. J., 1999
III.1.Crecimiento de microorganismos en medios sintéticos
III.1.1. Metodología experimental
Se prepararon diluciones de los aceites de ajo y cebolla para obtener las
concentraciones y cantidades probadas en los medios de cultivo sintéticos.
Posteriormente, en tubos de ensayo adicionados con las concentraciones de
aceites de ajo y cebolla y sus combinaciones según lo indica la Tabla 2, además
de un testigo sin aceites, se inocularon concentraciones conocidas de los
microorganismos que se indican a continuación.
La cepa de L. pentosus (31035) fue amablemente proporcionada en su forma pura
por la Doctora Lore Andersen, de Christian Hansen, Dinamarca. El cultivo
liofilizado se reactivó en caldo MRS, (Oxoid, Basingstoke, GB), incubado a 30 o C
por 24 horas. Posteriormente se incubaron matraces con 25 ml de medio MRS con
1 % del cultivo con densidad óptica igual a 1 y se incubó por o C 24 horas a 30.
Se prepararon tubos de ensaye con las concentraciones de aceites de ajo y
cebolla indicados en la Tabla 2 y a estos se inocularon al 1 % del cultivo con
densidad óptica = 1. Los tubos se incubaron a 30 o C por un total de 2 días,
midiendo cada 4 horas durante 2 días la densidad óptica. Este experimento se
realizó por triplicado y se repitió 2 veces.
El análisis de resultados de las curvas de crecimiento en los bioensayos, se
realizó a través de las ecuaciones de cada tratamiento y cada nivel, obtenidas a
partir de las lecturas de la absorbancia. Las funciones polinónicas (y(x)) de tercer
orden, en estos bioensayos, la variable independiente x representa al tiempo en
horas, entre el inicio del crecimiento y la culminación de la fase exponencial, 30
horas para Lactobacillus pentosus. El intervalo de interés se justifica en conocer
como responde el crecimiento a lo largo del tiempo y(x) con cada uno de los
tratamientos y niveles probados entre la inoculación y el inicio de la fase
estacionaria (Figura 1). El polinomio o ecuación que simula el crecimiento está
influído por la variable de tiempo (x 3 , x 2 , x).
IV. RESULTADOS Y DISCUSIÓN
IV.1. Crecimiento de microorganismos en medios sintéticos
Las ecuaciones lineales (de tercer órden), enlistadas en la Tabla 3 tienen la misma
tendencia, se localiza un punto máximo en todas las curvas para el mismo
intervalo de tiempo seleccionado, coeficientes de correlación similares por lo que