Quantitativer Nachweis von Lawsonia intracellularis mittels real-time ...

Material und Methoden
Tabelle 37: Untersuchungsschema zur Überprüfung eines Einflusses der Lagerung
auf den Gehalt von GE von L. intracellularis in der Probe
Tag 0 X
frisch 6°C -20°C -70°C
Tag 1 X X X
Tag 2 X X X
Tag 3 X X X
Tag 7 X X X
Tag 14 X X X
Tag 28 X X X
Tag 56 X X X
Tag 132 X X X
X= Untersuchung der 10 aliquotierten Proben
Tabelle 38: Protokoll der PCR zur Untersuchung eines Einflusses der Lagerung von
Kotproben auf den Gehalt spezifischer GE von L. intracellularis
DNA-template: Proben natürlich infizierter Schweine
Aufgereinigt mit: QIAamp ® DNA Stool Mini Kit
Reaktionsmix:
12,5 µl TaqMan ® universal PCR Master Mix 2x
9 µl Primer- Mix
0,8 µl Exo IPC Mix 10x
0,2 µl Exo IPC DNA 50x
2,5 µl template-DNA
PCR-Gerät: 7500 Real-Time PCR System
PCR-Protokoll: s. Tabelle 7
Modifikationen: keine
Ergebnisauswertung: Wellenlänge ~ 520 nm für FAM
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