Quantitativer Nachweis von Lawsonia intracellularis mittels real-time ...

3.1 Guidelines
Material und Methoden
Die Validierung der real-time PCR wurde in Anlehnung an die Richtlinien der
European Agency for the Evaluation of Medicinal Products (EMEA), des Office
International des Épizooties (OIE) und der Qualitätssicherungsstelle im Bund/Länder-
Messprogramm Nord- und Ostsee (BLMP) (s. Kapitel 2.8) durchgeführt. Da in den
Richtlinien die Beschreibung unterschiedlicher Güteparameter verlangt wird, diese
aber nicht alle in einer einzigen zusammengefasst sind, wurden die Anforderungen
aus den Richtlinien kombiniert, um so eine möglichst umfassende Validierung zu
erreichen. Im Rahmen der vorliegenden Untersuchung wurden folgende Parameter
bestimmt (Tabelle (Tab.) 1):
Tabelle 1: Definition verschiedener Güteparameter quantitativer Testverfahren
Testparameter Definition
Spezifität 1
(specificity)
Präzision 1
(precision)
Nachweisgrenze 1
(detection limit)
Spezifität ist die Fähigkeit des Testes, den Analyten auch in
Anwesenheit anderer Komponenten in der Probe eindeutig
zu identifizieren.
Die Präzision ist der Grad der Streuung innerhalb von
Messwiederholungen aus einer homogenen Probe
angegeben als Standardabweichung.
Wiederholpräzision
(repeatability)
Vergleichspräzision
(intermediate
precision)
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Die Wiederholpräzision ist die
Präzision unter identischen
Testbedingungen.
Die Vergleichspräzision drückt die
Präzision des Testes unter
verschiedenen Bedingungen aus.
Die Nachweisgrenze ist die kleinste Menge des Analyten,
die detektiert, aber nicht unbedingt quantifiziert werden
kann.