20.02.2013 Aufrufe

Quantitativer Nachweis von Lawsonia intracellularis mittels real-time ...

Quantitativer Nachweis von Lawsonia intracellularis mittels real-time ...

Quantitativer Nachweis von Lawsonia intracellularis mittels real-time ...

MEHR ANZEIGEN
WENIGER ANZEIGEN

Erfolgreiche ePaper selbst erstellen

Machen Sie aus Ihren PDF Publikationen ein blätterbares Flipbook mit unserer einzigartigen Google optimierten e-Paper Software.

Material und Methoden<br />

Tabelle 14: Protokoll der PCR (II+III) zur Überprüfung der analytischen Spezifität<br />

der Primer<br />

DNA-template: <strong>Lawsonia</strong> <strong>intracellularis</strong> MS B3903<br />

Referenzstämme<br />

Aufgereinigt mit: DNeasy ® Blood & Tissue Kit<br />

Reaktionsmix:<br />

NucleoSpin ® Tissue Kit<br />

12,5 µl Power SYBR ® Green PCR Master Mix 2x<br />

2,25 µl Primer Li-Ubi F (10 pmol/ µl)<br />

2,25 µl Primer Li-Ubi-R (10 pmol/ µl)<br />

5,5 µl Wasser<br />

2,5 µl template-DNA<br />

PCR-Gerät: 7500 Real-Time PCR System<br />

PCR-Protokoll: s. Tabelle 7<br />

Modifikationen: Zyklen: 40 statt 45<br />

Ergebnisauswertung: Wellenlänge ~ 520 nm für SYBR ® Green<br />

64

Hurra! Ihre Datei wurde hochgeladen und ist bereit für die Veröffentlichung.

Erfolgreich gespeichert!

Leider ist etwas schief gelaufen!