Quantitativer Nachweis von Lawsonia intracellularis mittels real-time ...

Literaturübersicht
war 91 %, wobei in der real-time PCR 6 % mehr Proben als positiv identifiziert
wurden (LINDECRONA et al. 2002).
2.4.2 Indirekter Erregernachweis
Der erste serologische Test zum Nachweis von Lawsonia-spezifischen Antikörpern
der Klassen IgM und IgA wurde 1988 entwickelt (LAWSON et al. 1988). Es wurde ein
indirekter IFT benutzt, um im Serum von natürlich und experimentell infizierten
Schweinen Immunglobuline nachzuweisen. Die IgM-Antikörper waren in den ersten
acht Wochen p. i. dominant nachweisbar. Für epidemiologische Studien wurde
anschließend ein indirekter IFT zum Nachweis von spezifischen Immunglobulinen
der Klasse IgG entwickelt, da diese Antikörper-Klasse ist im Serum über einen
längeren Zeitraum nach der Infektion nachweisbar ist als IgM. Erste Antikörper sind
mit dieser Methode ab dem Tag 14 p. i. detektierbar. Ab Tag 21 nach der
experimentellen Infektion konnten 90 % der infizierten Schweine positiv auf
Antikörper der Klasse IgG getestet werden. Dieser spezifische und schnelle Test
besitzt eine Nachweisgrenze bei einem Titer von 1:1000. In dieser Studie war die
Sensitivität des IFT deutlich höher (90 % der infizierten Tiere positiv) als die der
ebenfalls an der Versuchsgruppe durchgeführte PCR an Kot (39 % der infizierten
Tiere positiv) (KNITTEL et al. 1998). Der IPMA ist ein weiteres serologisches
Nachweisverfahren für L. intracellularis-spezifische Antikörper der Klasse IgG. Die
Spezifität dieses Tests ist nur in Serumverdünnungen sehr hoch (100 %), da bei
Verwendung von unverdünntem Serum die hohe Hintergrundfärbung eine
Auswertung des Tests stark erschwert (Spezifität 5 %). Die Sensitivität nimmt
allerdings mit dem Verdünnungsgrad des Serums ab; sie beträgt bei einer
Verdünnung von 1:30 nur noch 89 % (GUEDES et al. 2002b).
In einer vergleichenden Untersuchung konnten deutliche Differenzen zwischen den
Ergebnissen von IFT und IPMA festgestellt werden. Die Übereinstimmung zwischen
den beiden Tests betrug auf Einzeltierniveau nur 28 %. Diese Diskrepanz ist durch
die unterschiedliche Sensitivität zu erklären, wobei der IFT mehr falsch positive
Ergebnisse liefert, der IPMA hingegen mehr falsch negative. Beide Tests sind
dadurch charakterisiert, dass eine subjektive mikroskopische Auswertung
vorgenommen wird. Trotz der verbesserten Übereinstimmung der Testergebnisse auf
Herdenniveau (55 %) muss die Einstufung der Herden in positiv und negativ
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