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Quantitativer Nachweis von Lawsonia intracellularis mittels real-time ...

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Material und Methoden<br />

Tabelle 28: Protokoll der PCR zur Feststellung der Vergleichspräzision an Plasmid-<br />

DNA<br />

DNA-template: Plasmid-DNA<br />

Aufgereinigt mit: PureLink Hipure Plasmid Maxiprep Kit<br />

Reaktionsmix:<br />

12,5 µl TaqMan ® universal PCR Master Mix 2x<br />

10 µl Primer- Mix<br />

2,5 µl template-DNA<br />

PCR-Gerät: 7500 Real-Time PCR System<br />

PCR-Protokoll: s. Tabelle 7<br />

Modifikationen: keine<br />

Ergebnisauswertung: Wellenlänge ~ 520 nm für FAM<br />

Tabelle 29: Protokoll der PCR zur Feststellung der Vergleichspräzision an Proben<br />

natürlich infizierter Schweine<br />

DNA-template: Proben natürlich infizierter Schweine<br />

Aufgereinigt mit: QIAamp ® DNA Stool Mini Kit<br />

Reaktionsmix:<br />

12,5 µl TaqMan ® universal PCR Master Mix 2x<br />

9 µl Primer- Mix<br />

0,8 µl Exo IPC Mix 10x<br />

0,2 µl Exo IPC DNA 50x<br />

2,5 µl template-DNA<br />

PCR-Gerät: 7500 Real-Time PCR System<br />

PCR-Protokoll: s. Tabelle 7<br />

Modifikationen: keine<br />

Ergebnisauswertung: Wellenlänge ~ 520 nm für FAM<br />

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