Quantitativer Nachweis von Lawsonia intracellularis mittels real-time ...

Ergebnisse
In der Gelelektrophorese konnte durch den Vergleich mit einem Größenmarker
gleichzeitig die Größe des PCR-Produktes bestimmt werden. Die Größe der PCR-
Produkte betrug ca. 550 bp (+/- 50 bp) und lag somit nahe der zuvor berechneten
Größe von 525 bp.
800 bp
500 bp
300 bp
100 bp
annealing-Temperatur in °C
DNA-Leiter 56,0 56,2 56,6 57,1 57,9 58,7 59,5 60,3 61,0 61,6 61,9 62,0 NTC
Abbildung 5: Gelelektrophoretische Auftrennung der PCR-Produkte nach
Gradienten-PCR; template-DNA ist Lawsonia intracellularis MS
B3903; Angabe der annealing-Temperaturen in °C
Die Transformation kompetenter E. coli wurde mit Vektoren durchgeführt, denen zur
Ligation des Inserts zunächst 2 µl PCR-Produkt (70,0; 72,5 und 95 ng DNA pro µl)
resp. 3 µl PCR-Produkt (35 ng DNA pro µl) zugegeben wurde. Nach Bebrütung der
LB-Nährböden waren auf allen Agarplatten massenhaft weiße und nur vereinzelt
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