Quantitativer Nachweis von Lawsonia intracellularis mittels real-time ...

10 8 GE / µl
Ergebnisse
10 7 bis 10 1 GE / µl
104
10 0 GE / µl 10 -1 GE / µl
Abbildung 8: amplification plot zur Detektion des oberen Quantifizierungs-
limits; dargestellt sind Plasmidverdünnungen zwischen 10 8 und
10 -1 GE / µl Reaktionsvolumen; die Amplifikationskurve und der
∆Rn-Wert für die Konzentration von 10 8 GE / µl weichen deutlich
ab.
4.1.9 Interne Positivkontrolle
Die IPC hatte in solchen Proben, in denen L. intracellularis nicht nachgewiesen
wurde, einen Ct-Wert von ca. 34. Der Ct-Wert der IPC erhöhte sich mit steigendem
Gehalt spezifischer Genomfragmente von L. intracellularis in den Proben. Wurde in
Proben sehr viel der eigentlichen Ziel-DNA amplifiziert, waren PCR-Produkte der IPC
nicht mehr detektierbar.
Mit dem Ziel, einen möglichen Einfluss der Amplifikation einer IPC auf die eigentliche
Reaktion zu überprüfen, wurden Plasmidlösungen mit und ohne IPC quantifiziert. Es
konnten keine signifikanten Unterschiede zwischen den Ct-Werten derselben Proben