Quantitativer Nachweis von Lawsonia intracellularis mittels real-time ...

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Literaturübersicht aufgrund der Diskrepanzen in 45 % aller Fälle mit entsprechender Vorsicht erfolgen (CORZO et al. 2005). Andere serologische Vergleichsuntersuchungen von IFT und IPMA haben eine Übereinstimmung von 98,6 % gezeigt, jedoch wurde keine Differenzierung in Herden- oder Einzeltierniveau vorgenommen (GUEDES et al. 2002c). Ein enzyme linked immunsorbent assay (ELISA) wurde auf der Basis des LSA- Antigens entwickelt (WATARAI et al. 2004a), das von L. intracellularis auf der Oberfläche exprimiert wird und vermutlich der Anheftung und dem Eindringen in die Enterozyten dient (MCCLUSKEY et al. 2002). Mit einem synthetisierten Epitop des LSA-Antigens konnte im ELISA eine starke Reaktion von Serum infizierter Kaninchen nachgewiesen werden (WATARAI et al. 2004a). Lipopolysaccharide (LPS) von L. intracellularis wurden ebenfalls als Zielstruktur im indirekten ELISA zum Nachweis von IgG eingesetzt. Die hohe Spezifität (100 %) und Sensitivität (99,5 %) des Tests konnte an Seren solcher Tiere gezeigt werden, die experimentell infiziert wurden. In einer vergleichenden Untersuchung konnten mittels indirektem LPS-ELISA signifikant mehr Tiere nach Impfung oder experimenteller Infektion als positiv befundet werden als mit einem IFT. Dieser Test kann darüber hinaus die L. intracellularis-Infektionen in einem früheren Stadium nachweisen als der IFT (KROLL et al. 2005b). Ein anderer indirekter ELISA zeigte eine durchschnittliche Sensitivität von 98 % und eine durchschnittliche Spezifität von 99,3 %. Der ELISA ist in beiden Parametern dem IFT und dem IPMA überlegen (BOESEN et al. 2005b). In Deutschland ist ein vom Friedrich-Löffler-Institut zugelassener blocking ELISA zum Nachweis von Antikörper gegen Lawsonia intracellularis unter dem Warennamen Enterisol® Ileitis ELISA kommerziell erhältlich. Sensitivität und Spezifität dieses Tests werden mit 97 % resp. 98 % angegeben (KELLER et al. 2004) 2.4.3 Weitere Nachweismethoden für L. intracellularis Andere Verfahren zum Nachweis von L. intracellularis werden überwiegend für wissenschaftliche Untersuchungen und nur selten in der Routinediagnostik eingesetzt. Neben der in situ-Hybridisierung an Darmmukosa erkrankter Schweine (GEBHART et al. 1991) ist es möglich, mit Hilfe von magnetischen „Perlen“, die mit Anti-LSA- 23
Literaturübersicht Antikörpern aus Kaninchenserum beschichtet sind, L. intracellularis aus Kot zu isolieren und mittels Biolumineszenz sichtbar zu machen (WATARAI et al. 2004b). Im hochspezifischen polymerase chain reaction-enzyme-linked oligosorbent assay (PCR-ELOSA) werden markierte PCR-Produkte in eine Mikrotiterplatte hybridisiert und mittels eines Avidin-Biotin-Peroxidase-Komplexes sichtbar gemacht. Die Auswertung erfolgt automatisiert über die optische Dichte bei einer Wellenlänge von 450 nm (ZHANG et al. 2000). 24
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Material und Methoden Tabelle 37: U
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Ergebnisse Arcanobacterium pyogenes
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4.1.6 Sequenzierung Ergebnisse Die
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Ergebnisse hellblaue sowie blaue Ko
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Ergebnisse Mit einer Konzentration
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4.1.10 Vergleichspräzision Ergebni
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Ergebnisse Tabelle 41: diagnostisch
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Ergebnisse entspricht einer Wiederf
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Ergebnisse Tabelle 44: Ergebnisse d
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Quantität GE / µl Reaktionsvolume
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5 Diskussion Diskussion Die vorlieg
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Diskussion gebildet werden. Verglei
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Diskussion Milliliter mit 50 µl) u
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Diskussion Inhibitoren während der
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Diskussion Proben spezifische Genom
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Diskussion 5.2 Verteilung von L. in
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5.4 Schlussfolgerungen Diskussion D
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Zusammenfassung auch zur Erstellung
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Summary genome equivalent per react
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ANONYM (1998b): Literaturverzeichni
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Literaturverzeichnis BOESEN, H.T.,
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Literaturverzeichnis CORZO, C.A., R
Seite 161 und 162:
Literaturverzeichnis GROSS-BELLARD,
Seite 163 und 164:
Literaturverzeichnis HOLLAND, P.M.,
Seite 165 und 166:
Literaturverzeichnis JORDAN, D.M.,
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Literaturverzeichnis KUBISTA, M., J
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Literaturverzeichnis LINDECRONA, R.
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Literaturverzeichnis MARSTELLER, T.
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Literaturverzeichnis MCORIST, S., A
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Literaturverzeichnis NIEDERHAUSER,
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SAIF, L.J., u. R.D. WESLEY (1999):
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Literaturverzeichnis SUH, D.-K., S.
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Literaturverzeichnis WIDJOJOATMODJO
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Anhang 7 12.12 12.1066667 7 12.11 6
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Anhang Tabelle 47: Quantität von G
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Anhang Tabelle 51: Ergebnisse der q
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Danksagung Ich danke Frau Priv.- Do
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