Quantitativer Nachweis von Lawsonia intracellularis mittels real-time ...

2.2 Lawsonia intracellularis
Literaturübersicht
L. intracellularis gehört zur Familie der Desulfovibrionaceae und ist ein obligat
intrazellulär vermehrendes, stäbchenförmiges gramnegatives Bakterium. Es ist
zwischen 1,25 und 1,75 µm lang und zwischen 0,5 und 1,5 µm breit. Der
Bakterienkörper ist unterschiedlich stark gebogen, die Zellenden sind verjüngt. Es
bildet keine Sporen, ist unpigmentiert und nicht von einer Kapsel umgeben. Die
Bakterienwand wird von einer äußeren dreiblättrigen welligen Membran umhüllt. Das
Bakterium besitzt, im Gegensatz zu den unipolar begeißelten Desulfovibrio
desulfuricans, keine Pili oder Fimbrien und zeigt keine Motilität. Isolate aus
Zellkulturen besitzen ein unipolares Flagellum. Die Zellwand ist in der modifizierten
Ziehl-Neelsen Färbung säurefest (MCORIST et al. 1995a, LAWSON u. GEBHART
2000). Morphologisch ist L. intracellularis den Desulfovibrionaceae ähnlich, jedoch
kann L. intracellularis kein Sulfat reduzieren (MCORIST et al. 1995a).
Das Genom von L. intracellularis wurde an der University Minnesota durch KAUR et
al. vollständig sequenziert (Accession NC_008011) (www.ncbi.nlm.nih.gov/sites/
entrez/viewer.fcgi?db=nucleotide&val=NC_008011). Es besteht aus einem ring-
förmigen Chromosom, dass ca. 1,46 Megabasen lang ist, 1231 Gene enthält und für
1180 Proteine kodiert. Zusätzlich zu dem ringförmigen Chromosom gibt es 3
zirkuläre Plasmide. Diese sind zwischen 27 und 194 Kilobasen lang und kodieren für
29, 24 resp. 104 Proteine. In einer vergleichenden Untersuchung konnte anhand von
Wachstumsbedingungen, Antigeneigenschaften sowie der PCR und Sequenzierung
eines 319 Basenpaare (bp) langen desoxyribonucleic acid-(DNA)-Abschnittes keine
Variation zwischen europäischen und amerikanischen Isolaten von L. intracellularis
festgestellt werden (KNITTEL et al. 1996). Japanische Isolate, die aus Proben vom
Schwein isoliert wurden, zeigten in der DNA-Sequenz von vier Genen eine
Homologie von 99,6 % bis 100 % zum Typstamm aus Dänemark (KOYAMA et al.
2006). Das Genom von L. intracellularis ist stark konserviert. Durch Untersuchungen
an vier variable number tandem repeat (VNTR)-regions konnten dennoch
verschiedene VNTR-Profile erstellt werden, die für L. intracellularis aus Proben
natürlich infizierter Schweine und für den attenuierten Stamm, der in einem Impfstoff
verwendet wird (Enterisol ® Ileitis, Boehringer Ingelheim) charakteristisch waren
(BECKLER et al. 2005).
4