Quantitativer Nachweis von Lawsonia intracellularis mittels real-time ...

Diskussion
5.1.10 Anwendung des Testverfahrens in der Diagnostik
Die real-time PCR wurde mit dem Ziel entwickelt, die Methode zur Bearbeitung
wissenschatlicher Fragestellungen, aber auch in der Routinediagnostik anzuwenden.
Der Test soll die Möglichkeit bieten, zwischen verschiedenen Erregermengen im Kot
und somit auch Erregerausscheidung vom Tier zu differenzieren. Eine Interpretation
der Ergebnisse setzt jedoch voraus, dass Korrelationen zwischen der
ausgeschiedenen Erregermenge und der Ausprägung klinischer resp.
pathomorphologischer Krankheitsmerkmale bekannt sind. Besteht ein solcher
Zusammenhang, könnte in Analogie zum quantitativen Nachweis des porzinen
Circovirus Typ 2 ein „cut-off“ festgelegt und dazu verwendet werden, zwischen der
Ausscheidung klinisch relevanter resp. nicht relevanter Erregermengen zu
unterscheiden (OLVERA et al. 2004). In einem Infektionsversuch mit L. intracellularis
konnte bereits gezeigt werden, dass eine positive Korrelation zwischen der
inokulierten Erregermenge und der Ausprägung der Krankheit besteht (GUEDES et
al. 2003b).
Ein quantitatives Nachweisverfahren für L. intracellularis eignet sich potentiell zur
Untersuchung folgender Fragestellungen:
� Feststellung der minimalen Infektionsdosis für die PPE; bis heute nicht
bekannt (GUEDES et al. 2003b).
� Identifikation möglicher Infektionsquellen; „carrier“-Tiere und kontaminierte
Vektoren werden vermutet (JORDAN et al. 2004, GUEDES et al. 2004).
� Diskriminierung geimpfter und ungeimpfter Tiere im direkten Vergleich; mit
den derzeit zur Verfügung stehenden Methoden ist das nicht möglich
(GUEDES u. GEBHART 2003a). KROLL et al. stellten 2004 die Hypothese auf,
dass geimpfte Tiere „weniger“ Erreger ausgescheiden.
In epidemiologischen Studien zur Infektion mit L. intracellularis wurde bislang die
Erregerausscheidung nur qualitativ betrachtet. Die real-time PCR bietet nun die
Möglichkeit, in Verlaufs- oder Querschnittsuntersuchungen nicht nur die Anzahl
ausscheidender Schweine, sondern zusätzlich auch die ausgeschiedene
Erregermenge individuell zu erfassen.
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