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Quantitativer Nachweis von Lawsonia intracellularis mittels real-time ...

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Ergebnisse<br />

4.1.5 Überprüfung der analytischen Spezifität der Sonde<br />

Die analytische Spezifität der Sonde Li-Ubi-Probe wurde in einer Konzentration <strong>von</strong><br />

200 nM zusammen mit den Primern Li-Ubi-F und –R in einer PCR an der DNA<br />

unterschiedlicher Referenzstämme überprüft. Ein positives Signal konnte mit DNA<br />

<strong>von</strong> <strong>Lawsonia</strong> <strong>intracellularis</strong> MS B3903 erzeugt werden. Im Gegensatz dazu wurde<br />

bei keiner anderen DNA ein positives Signal in der <strong>real</strong>-<strong>time</strong> PCR erzeugt (Abb. 4).<br />

Dieses galt auch für solche Bakterien, die zunächst im SYBR ® Green System eine<br />

unerwünschte Amplifikation mit den Primern Li-Ubi-F und -R gezeigt haben.<br />

<strong>Lawsonia</strong> <strong>intracellularis</strong> MS B3903<br />

Abbildung 4: amplification plot zur Überprüfung der analytischen Spezifität der<br />

Sonde; die Sonde wurde in einer Konzentration <strong>von</strong> 200 nM<br />

verwendet; template-DNA sind die Referenzstämme inklusive<br />

<strong>Lawsonia</strong> <strong>intracellularis</strong> MS B3903<br />

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