Mechanistische Analysen zu Krankheits-korrelierten SNPs in ...

6.8 Gen-spezifische RNAi-vermittelte Therapie
aufgrund einer erhöhten Anzahl an CAG-Repeats, was zu toxischen Eigenschaften des Proteins
führt [188]. Pfister et al. [189] untersuchten die Möglichkeit einer Hemmung von Huntingtin
mittels Allel-spezifischer siRNAs. Diese sind nicht gegen die Sequenz der Repeats,
sondern gegen Abschnitte innerhalb der Huntingtin-Sequenz, die sich zwischen den Patienten
durch das Vorliegen verschiedener SNP-Varianten unterscheiden, gerichtet. Es werden
also Patienten-spezifische siRNAs eingesetzt, um die mutierte Huntingtin mRNA zu hemmen.
Die von drei SNPs ausgehende, unter Verwendung von fünf Allel-spezifischen siRNAs
vermittelte Hemmung des krankhaft veränderten Huntingtins böte eine Therapiemöglichkeit
für etwa 75 % der Chorea Huntington Patienten. Ein vergleichbarer Ansatz existiert für die
Therapie von Spinozerebellärer Ataxie 7, die sich ebenfalls durch CAG-Repeats des Ataxin-7
manifestiert [190]. Weiterhin wurde der Einsatz von Allel-spezifischen siRNAs zur Hemmung
von mutiertem Kollagen (COL3A1 11 ) zur personalisierten Therapie des vaskulären Typs des
Ehlers Danlos-Sydroms, einer bisher unheilbaren Bindegewebsstörung, untersucht [191].
6.8.3 miR-SNPs und Therapieansätze
MiR-SNPs können zu einer gesteigerten oder verminderten miRNA-vermittelten Regulation
der Genexpression eines Ziel-Gens führen und so an der Ausbildung eines pathologischen
Phänotyps beteiligt sein. Somit ist eine Gen-spezifische, Oligonukleotid-basierte
Therapie durch miRNA-Zugabe bzw. miRNA-Inhibition denkbar. Dennoch muss eine Allelspezifische
Therapie von miR-SNPs deutlich von den bisherigen Therapieansätzen mit Allelspezifischen
siRNAs (siehe Abschnitt 6.8.2) abgegrenzt werden. Die durch Expression
krankhaft veränderter Gene hervorgerufene Erkrankungen sind nicht vergleichbar mit auf
einer veränderten Gendosis basierenden Phänotypen. Eine weitere Erschwernis für den
Einsatz von miRNA-basierten Wirkstoffen liegt darin begründet, dass miRNAs endogene
Regulatoren der humanen Genexpression sind, während siRNAs als Gen-spezifische „Werkzeuge“
eingesetzt werden können.
Die artifizielle Überexpression einer miRNA kann neben der Expression des Gens von Interesse
auch die weiterer Gene, die entsprechende Ziel-Gene der miRNA sind, beeinflussen.
Im Fall von SNPs innerhalb einer miRNA Bindestelle kann das Einführen von SNPs in die
miRNA-Sequenz zur Wiederherstellung der Basenpaarung zur SNP-Variante dazu führen,
dass eine derartig modifizierte, nicht authentische miRNA zusätzliche endogene Ziel-Gene
hat. Darüber hinaus haben die Ergebnisse der vorliegenden Arbeit gezeigt, dass ein SNP innerhalb
einer miRNA Bindestelle neben den thermodynamischen Eigenschaften der miRNA-
Ziel-RNA Bindung ebenfalls die strukturelle Zugänglichkeit der Ziel-RNA beeinflussen kann.
Möglicherweise damit im Zusammenhang stehend, war außerdem zu beobachten, dass eine
seed Komplementarität nicht immer mit einer stärkeren miRNA-vermittelten Repression
einhergeht. Dies zeigte sich sowohl im AGTR1- als auch TCF21-System. So wurde die
11 collagen type III alpha 1
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