Last ned - Helsedirektoratet
Last ned - Helsedirektoratet
Last ned - Helsedirektoratet
Create successful ePaper yourself
Turn your PDF publications into a flip-book with our unique Google optimized e-Paper software.
192<br />
Overføring av DNA til celler<br />
Metodemessig og økonomisk sett er direkte<br />
overføring av rent DNA den enkleste genterapeutiske<br />
fremgangsmåten. Den har<br />
imidlertid begrenset anvendelse fordi slikt<br />
”nakent” DNA tas kun opp i bestemte typer<br />
vev og krever dessuten store mengder DNA.<br />
For å fremme opptaket av DNA i cellene,<br />
også i celler som normalt ikke ville ta opp<br />
DNA, må vanligvis DNA’et kobles til større<br />
komplekser med positivt ladete polymerforbindelser,<br />
eller pakkes i positivt ladete<br />
liposomer – små fettbobler som fremmer<br />
opptaket av det genetiske materialet.<br />
Metodene ovenfor er relativt uspesifkke<br />
med hensyn til hvilke typer vev eller celler<br />
DNA’et tas opp i, og er ofte basert på<br />
direkte injeksjon i det vevet som skal<br />
behandles. Imidlertid har utviklingen innen<br />
nanoteknologi gitt genterapeuter nye<br />
muligheter for å målrette DNA-overføringene.<br />
Ved å danne kompleks mellom DNA<br />
og nanopartikler designet spesielt med<br />
tanke på kreftsvulsters fysiologi har forskere<br />
etter intravenøs injeksjon i forsøksdyr<br />
kunnet demonstrere DNA-opptak og<br />
spesifkk genekspresjon utelukkende i<br />
tumorvevet 275 . Det foregår nå intens<br />
forskning på bruk av nanopartikler både<br />
med tanke på å målrette DNA-opptak og å<br />
gjøre effektiviteten kompatibel med viral<br />
overføring. Disse prinsippene anvendes<br />
også for overføring av RNA.<br />
6.3 Andre innfallsvinkler til genterapi<br />
I det følgende beskrives strategier for hvordan<br />
overføring av genetisk materiale til celler kan<br />
ha terapeutisk effekt, også i tillegg til bare å<br />
erstatte et defekt gen.<br />
Ved en arvelig gendefekt er det naturlig å tenke<br />
seg at man retter feilen ved å overføre en<br />
korrekt genvariant ved en av metodene nevnt<br />
ovenfor. Imidlertid kan en gendefekt også<br />
manifestere seg ved at genproduktet er endret<br />
til noe som er skadelig for kroppen og må<br />
elimineres, eller at gener feilaktig skrus på, noe<br />
som ofte er årsaken til at celler blir kreftceller.<br />
6.3.1 RNA-molekyler som terapeutikum<br />
Når et gen uttrykkes lages først en arbeidskopi<br />
på grunnlag av DNA-sekvensen, et såkalt<br />
messenger- eller budbringer-RNA-molekyl<br />
(mRNA) som så avleses til protein. Mye av<br />
cellenes genregulering foregår ved at en lang<br />
rekke gener som ikke koder for protein kommer<br />
til uttrykk. Fra disse genene lages kun RNAmolekyler<br />
som har til oppgave å påvirke avlesingen<br />
av RNA til protein, ved såkalt RNAinterferens.<br />
De interfererende RNA-molekylene<br />
binder til mRNAet som skal lage protein og<br />
avbryter enten avlesingen, eller aktiverer<br />
<strong>ned</strong>brytning. Ved å tilføre RNA-molekyler som<br />
spesifkt kan interferere med mRNA fra muterte,<br />
skadelige gener, er det mulig å stanse produksjonen<br />
av for eksempel kreftfremkallende<br />
proteiner. Overføring av RNA-molekyler kan<br />
foregå enten ved produksjon fra virale vektorer<br />
eller fra plasmider, eller de kan overføres som<br />
nakent RNA i kompleks med andre bærermolekyler<br />
som beskrevet ovenfor.<br />
At det terapeutiske genetiske materialet ikke<br />
integrerer, betyr at det tynnes ut gjennom<br />
celledelingsprosessen. Derfor er det nødvendig<br />
med gjentatte behandlinger, noe som byr på<br />
problemer ved bruk av virale vektorer, siden<br />
effekten avtar fordi pasienten etter hvert opp-<br />
275 Chisholm EJ et al. (2009): Cancer-specifc transgene expression mediated by systemic injection of nanoparticles. Cancer Res 69 (6): 2655-62
Change language