I Conferência Internacional Virtual sobre Qualidade de Carne Suína ...

1 a Conferência Internacional Virtual sobre Qualidade de Carne Suína16 de novembro a 16 de dezembro de 2000 — Concórdia, SCcarcaças. Os métodos imunológicos utilizam anticorpos que devem se ligarespecificamente aos compostos a serem testados e não a outros. A quantidade deanticorpos ligados é então medida usando radioisótopos em radioimunoensaio (RIA)ou uma enzima que produz um produto colorido na enzima ligada a ensaio imunoespecífico(ELISA). Foram desenvolvidos RIAs para androstenona (Andresen, 1979;Uzu e Bonneau, 1980) e ELISAs para escatol (Singh et al., 1988) e androstenona(Abouzied et al., 1990; Claus et al., 1988). Os métodos imunológicos podem serlimitados pelo longo tempo necessário para desenvolver o equilíbrio da ligação doanticorpo e a necessidade da extração cuidadosa de amostras de gordura. Estesfatores também introduzem uma quantidade significativa de variação nestes ensaios,sendo comum encontrar coeficientes de variação de mais de 10%. Foi desenvolvidoum método rápido de extração de androstenona da gordura para ser usados emimuno-ensaios (Claus et al., 1997).Foram relatados métodos cromatográficos que utilizam cromatografia líquida dealto desempenho (HPLC) ou cromatografia gasosa (CG) para medir escatol eandrostenona. A análise de escatol em HPLC utiliza colunas de fase reversa eluídascom sistemas de solventes isocráticos ou gradientes e usam detecção por ultravioletaou fluorescência (Garcia-Regueiro e Diaz, 1989; Lin et al., 1991; Hansen-Møller,1992; Tuomola et al., 1996). A análise da androstenona em HPLC envolve aconjugação a um cromóforo para detecção, uma vez que a androstenona não tem fortefluorescência ou absorve muito na região ultravioleta. Está sendo desenvolvido ummétodo combinado para a análise de androstenona, escatol e indol (Hansen-Møller,1994). A análise do escatol e da androstenona por CG tem sido descrita por detectorde ionização de chama (Porter et al., 1989), detector de capturador de elétrons (deBrabander e Verbeke, 1986), detector termo-iônico específico (Peleran e Bories, 1985)e espectrofotometria de massa (Garcia-Regueiro et al., 1989; Edelhaeuser, 1989;Kwan et al., 1992). A extração cuidadosa das amostras é necessária para a análisecromatográfica, tanto para assegurar boa resolução das amostras, como para mantera vida útil da coluna. A androstenona também foi medida por espectrofotometriade massa depois da extração do fluido supercrítico (Tuomola et al., 1998). Foramdesenvolvidos métodos para a extração de amostras de gordura para a análise doescatol por HPLC (Hansen-Møller, 1992; Dehnhard e Claus, 1992). Os métodoscromatográficos têm a vantagem de medir uma série de compostos relacionadosao mesmo tempo e geralmente são bastante específicos, não sendo afetados porcompostos que podem interferor. No entanto, podem ser demorados, tecnicamentedifíceis, caros e suscetíveis a falhas no equipamento. Por isso, geralmente são maisadequados para uso em análise experimental, e não para a análise de rotina decompostos de odor sexual na linha de abate.Foram descritos métodos colorimétricos para a análise do escatol e dos esteróides16-androstenos. O teste para escatol (Mortensen e Sorensen, 1984) envolve aextração da amostra de gordura com tris-acetona e a mistura do extrato filtrado comoum reagente colorido que consiste de 4-dimetilaminobenzilaldeído em ácido sulfúricoe etanol. A intensidade da cor é então medida num espectrofotômetro a 580 nm. Oslimites de detecção do ensaio são de aproximadamente 0,02 ppm e o coeficiente devariação para 0,25 ppm foi de ± 4%. No entanto, outros compostos como o indol, quenão contribuem para o odor, são detectados pelo ensaio e os reagentes e produtos dereação são um pouco instáveis.180