Ganzheitliche Untersuchungsmethoden zur Erfassung und Prüfung ...

Validierung der Methoden und Ergebnisse der Vergleichsmessungen 242
4.5.2 Stand der Methoden zu Projektbeginn
Die Fragestellung der vorliegenden Untersuchungen ist es zu zeigen ob es möglich ist, Möhren
bzw. Weizen aus unterschiedlichen Anbausystemen anhand des Polyphenolspektrums zu
differenzieren.
Zur Analytik der Polyphenole wird in der Regel ihre Fähigkeit zur Lichtabsorption genutzt. Das
Absorptionsmaximum der Phenole hängt dabei von ihrer Struktur ab (MABRY et al. 1970). Die
Größe und die Komplexität des Moleküls entscheiden darüber, ob ein Phenol farbig erscheint oder
lediglich UV-Licht absorbiert. Diese UV-Absorption (zwischen 220 und 300 nm) ist allen Phenolen
gemeinsam.
Für den Nachweis von Polyphenolen in Pflanzenproben werden photometrische Methoden sowie
Papier- oder Dünnschichtchromatographie eingesetzt. Gelegentlich wurde auch die
Gaschromatographie für die Trennung von Phenolen verwendet. Dies setzt jedoch eine
Derivatisierung von nicht flüchtigen Polyphenolen voraus.
Ein direkter Nachweis von Polyphenolen, das heißt ohne vorherige Derivatisierung, kann mittels
der reversed - phase Hochleistungsflüssigkeitschromatographie (HPLC) geführt werden. Zur
Detektion werden meistens Spektralphotometer verwendet, deren Wellenlänge frei wählbar ist.
Durch die Wahl einer bestimmten Wellenlänge können einzelnen Klassen von Polyphenolen
selektiv detektiert werden (s. Tabelle 45)
Phenol Gruppe Absorptionsmaximum (nm)
Isoflavone 250 – 275
Flavanole 280
Hydroxyzimtsäuren 290 – 330
Flavanone 270- 290
Benzochinone 260 – 280, 375 – 410
Stilbene ca. 300
Flavonole 340 – 380
Tabelle 45: UV-Absorption ausgewählter phenolischer Substanzen
(nach: FEUCHT und TREUTTER 1989)
Dioden-Array-Detektoren (DAD) sind in der Lage gleichzeitig die Lichtabsorption mehrerer
Wellenlängen zu messen. Mit einem DAD ist es somit möglich während einer Analyse die
Ganzheitliche Untersuchungsmethoden zur Erfassung und Prüfung der Qualität ökologischer Lebensmittel