为 解 决 放 射 抗 拒 提 供 可 行 的 靶 点 。 本 研 究 以 人 喉 鳞 癌 细 胞 Hep-2 对 象 , 采 用 单 细 胞 克 隆 的方 法 , 建 立 了 系 列 具 有 放 射 敏 感 性 差 异 的 亚 细 胞 , 并 从 这 些 亚 细 胞 系 列 中 筛 选 出 最 具 有 原发 性 放 射 抗 拒 差 异 的 Hep-2max( 放 射 抗 拒 性 最 高 ) 和 Hep-2min( 放 射 抗 拒 性 最 低 ) 亚 细 胞 ,通 过 基 因 芯 片 筛 选 出 了 原 发 性 放 射 抗 拒 差 异 表 达 基 因 -PAGl( 鞘 糖 脂 微 结 构 域 1 相 关 磷 酸 化蛋 白 基 因 )。 进 一 步 采 用 RNA 干 扰 技 术 对 Hep-2max 细 胞 中 高 表 达 的 PAG1 基 因 进 行 封 闭 ,同 时 向 Hep-2min 细 胞 导 入 该 基 因 , 检 测 基 因 转 染 后 细 胞 放 射 抗 拒 性 的 改 变 , 证 明 干 扰PAG1 能 够 逆 转 放 射 抗 拒 亚 细 胞 Hep-2max 的 放 射 抗 拒 性 ; 同 时 外 源 性 PAG1 过 表 达 则 能 增 加放 射 敏 感 亚 细 胞 的 放 射 抗 拒 性 。 我 们 的 研 究 发 现 Hep-2 细 胞 原 发 性 放 射 抗 拒 的 关 键 分 子PAG1, 它 是 一 个 新 的 与 人 喉 鳞 癌 原 发 性 放 射 抗 拒 相 关 的 基 因 , 为 解 决 人 喉 鳞 癌 原 发 性 放 射抗 拒 提 供 了 可 靠 的 基 因 靶 点 和 实 验 依 据 。 本 研 究 结 果 证 实 了 人 喉 鳞 癌 细 胞 的 原 发 性 放 射 抗拒 是 不 同 于 辐 射 诱 导 后 获 得 性 放 射 抗 拒 的 分 子 事 件 。关 键 词 : 人 喉 鳞 癌 ; 鞘 糖 脂 微 结 构 域 1 相 关 磷 酸 化 蛋 白 基 因 ; 放 射 抗 拒 ; 细 胞 模 型学 科 代 码 :H1625发 表 论 著 : 无会 议 报 告 : 国 际 大 会 0 分 组 0 国 内 大 会 0 分 组 0培 养 人 才 : 博 士 后 0 博 士 0 硕 士 0鼻 咽 癌 中 p53 蛋 白 聚 集 的 分 子 机 制 研 究批 准 号 :30800419项 目 负 责 人 : 李 峰所 在 单 位 : 中 南 大 学超 过 一 半 的 癌 症 发 现 有 p53 突 变 , 而 鼻 咽 癌 中 p53 表 达 显 著 上 调 , 但 突 变 十 分 罕 见 。为 此 我 们 曾 采 用 RNAi 技 术 阻 断 鼻 咽 癌 细 胞 株 p53 蛋 白 的 内 源 性 表 达 , 采 用 串 联 亲 和 纯 化耦 联 质 谱 技 术 和 免 疫 共 沉 淀 耦 联 质 谱 等 靶 向 蛋 白 质 组 学 技 术 , 发 现 了 21 个 P53 相 互 作 用 蛋白 , 其 中 KRT5 是 一 个 重 要 的 相 互 作 用 蛋 白 质 。 进 一 步 用 免 疫 共 沉 淀 -Western blot 和 免 疫荧 光 双 标 记 观 察 等 方 法 验 证 KRT5 与 p53 蛋 白 之 间 的 相 互 作 用 。 用 Western blotting 和 免疫 组 织 化 学 检 测 KRT5 的 表 达 水 平 , 与 正 常 鼻 咽 粘 膜 细 胞 相 比 ,KRT5 在 NPC 中 表 达 明 显 下调 ,KRT 随 着 NPC 的 分 化 变 差 而 表 达 下 调 , 发 现 KRT5 的 表 达 水 平 与 NPC 的 临 床 分 期 、 组 织学 类 型 有 关 ,KRT5 低 表 达 的 NPC 组 织 表 现 更 晚 的 临 床 分 期 和 更 差 的 组 织 学 类 型 。 根 据 已 经建 立 的 CNE2/pSUPER 及 CNE2sip53 细 胞 , 分 析 了 二 维 凝 胶 电 泳 图 谱 及 与 鼻 咽 癌 中 的 p53 功能 相 关 蛋 白 质 。 这 些 蛋 白 质 可 能 与 鼻 咽 癌 细 胞 中 p53 蛋 白 功 能 失 活 的 分 子 机 理 有 关 , 为 鼻咽 癌 的 防 治 提 供 新 的 依 据 和 线 索 , 具 有 十 分 重 要 的 理 论 和 实 际 意 义 。关 键 词 : 鼻 咽 癌 ;p53 蛋 白 ; 蛋 白 质 相 互 作 用 ; 分 子 机 制-266-
学 科 代 码 :H1625发 表 论 著 :[1] Xiao Z, Li G, Chen Y, Li M, Peng F, Li C, Li F, Yu Y, *Chen Z. Quantitative proteomicanalysis of formalin-fixed and paraffin-embedded nasopharyngeal carcinoma using iTRAQlabeling, two-dimensional liquid chromatography, and tandem mass spectrometry. JHistochem Cytochem. 2010, 58(6): 517-527.[2] Li MX, Xiao ZQ, Chen YH, Peng F, Li C, Zhang PF, Li MY, Li F, Duan CJ, Li DJ, Yao HX,*Chen ZC. Proteomic analysis of the stroma-related proteins in nasopharyngeal carcinomaand normal nasopharyngeal epithelial tissues. Medical Oncology. 2009, 27(1): 134-144.[3] Li G, Xiao Z, Liu J, Li C, Li F, *Chen Z. Cancer: A proteomic disease. SCIENCE CHINALife Sciences. 2011, 54(5): 403-408.[4] 李 国 庆 , 肖 哲 锋 , 刘 健 平 , 李 萃 , 李 峰 , 陈 主 初 . 肿 瘤 : 一 种 蛋 白 质 组 病 . 中 国 科 学 : 生 命科 学 . 2010, 09: 788-794.[5] 李 美 香 , 肖 志 强 , 彭 芳 , 李 国 庆 , 张 鹏 飞 , 李 茂 玉 , 李 萃 , 李 峰 , 刘 迎 福 , 陈 主 初 . LCM纯 化 的 鼻 咽 癌 间 质 和 正 常 鼻 咽 间 质 的 定 量 蛋 白 质 组 学 研 究 . 生 物 化 学 与 生 物 物 理 进 展 .2009, 36(09): 1122-1133.会 议 报 告 : 国 际 大 会 0 分 组 0 国 内 大 会 0 分 组 0培 养 人 才 : 博 士 后 0 博 士 3 硕 士 1基 因 甲 基 化 在 鼻 息 肉 发 病 机 制 中 作 用 的 研 究批 准 号 :30801280项 目 负 责 人 : 赵 宇所 在 单 位 : 四 川 大 学【 目 的 】DNA 甲 基 化 在 肿 瘤 发 生 、 变 态 反 应 以 及 机 体 特 异 质 发 病 中 起 着 一 定 作 用 , 本 研究 以 此 为 假 设 , 试 探 索 甲 基 化 是 否 在 鼻 息 肉 (nasal polyps,NP) 的 发 病 机 制 中 也 发 挥 作用 。【 方 法 】 收 集 32 例 慢 性 鼻 鼻 窦 炎 伴 双 侧 NP 患 者 的 NP 组 织 , 对 照 组 为 18 例 行 鼻 中 隔成 形 术 患 者 的 下 鼻 甲 组 织 。 利 用 DNA 甲 基 化 全 基 因 组 芯 片 筛 查 出 NP 组 织 中 发 生 了 甲 基 化 的基 因 , 并 对 筛 选 出 来 的 兴 趣 基 因 进 行 后 续 验 证 ; 同 时 测 定 白 介 素 (interleukin,IL)5 和IL-17 在 NP 中 的 表 达 。【 结 果 】DNA 甲 基 化 芯 片 检 测 了 2848 个 基 因 中 包 含 的 8008 个 CpG岛 , 其 中 198 个 基 因 存 在 启 动 子 区 甲 基 化 。COL18A1 甲 基 化 频 率 在 NP 组 高 于 对 照 组 ( 卡 方值 =6.75,P0.05)。GNAS的 mRNA 表 达 在 两 组 之 间 有 统 计 学 差 异 (P=0.02)。 在 NP 组 内 COL18A1 甲 基 化 频 率 在 IL-5表 达 高 与 低 的 样 本 间 具 有 统 计 学 差 异 (P
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国 家 自 然 科 学 基 金 资
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progression. Lung Cancer. 2011 Nov;
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内 外 放 射 敏 感 性 检 测
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缺 氧 反 应 元 件 启 动 子
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肿 瘤 体 积 预 测 误 差 小
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关 。 它 是 否 参 与 肺 癌
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骨 形 态 发 生 蛋 白 7(BMP-7
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胰 岛 素 通 过 PKB 信 号 通
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乙 肝 病 毒 X 基 因 突 变
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HPC 可 以 显 著 增 强 人 大
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Syk 作 为 肝 癌 复 发 转 移
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作 用 . 中 华 普 通 外 科
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新 肝 癌 相 关 基 因 ALC1
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食 管 癌 转 移 高 风 险 性
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大 蒜 有 效 成 分 DADS 逆
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实 该 假 说 , 检 测 了 正
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双 重 纳 米 技 术 构 建 靶
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降 , 而 PC-3 细 胞 则 受 影
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质 微 泡 造 影 剂 对 卵 巢
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外 源 性 内 皮 祖 细 胞 在
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