Spunti di Nutrizione rev2011 - Clinica Pediatrica Trieste - Università ...

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5. La malattia celiaca L’era della transglutaminasi tessutale (il bersaglio molecolare degli anticorpi anti-endomisio). Negli anni novanta molti ricercatori erano convinti che l’individuazione dell’antigene endomisiale contro cui era rivolta la risposta autoimmune del celiaco avrebbe permesso di svelare gli aspetti ancora incogniti della patogenesi della malattia. Molte cose in realtà erano già state dimostrate: si conosceva la sequenza dei peptidi di gliadina (frazione proteica alcol-solubile del glutine) con maggior affinità per l’HLA DQ2 o DQ8; si erano isolati da biopsie intestinali cloni di linfociti CD4 in grado di riconoscere questi peptidi su cellule presentanti l’antigene provviste di HLA DQ2 e DQ8 52 ; si era dimostrato che questi linfociti producono grandi quantità di interferone gamma, che sono almeno in parte responsabili del danno mucosale (l’effetto viene bloccato da anticorpi anti- interferon gamma) 53 . Insomma, si sapeva che per essere celiaci era necessario avere un determinato HLA di rischio e si capivano anche le basi immunologiche e molecolari di questa predisposizione. Tuttavia solo una parte dei soggetti con questo profilo genetico sviluppava la celiachia. Inoltre, la malattia si associava alla presenza di anticorpi anti-endomisio ancora più specificamente che agli anticorpi anti-glutine e sembrava ragionevole ritenere che questa fosse la 86
87 5. La malattia celiaca caratteristica che meglio differenziava quell’un per cento di celiaci da tutti gli altri soggetti con DQ2 e DQ8. Di conseguenza, era logico prevedere che l’identificazione del vero bersaglio molecolare di questi anticorpi avrebbe permesso di spiegare anche che cosa differenzia il celiaco dagli altri soggetti con gli stessi HLA o, in altre parole, che cosa fa si che alcuni soggetti con quel determinato HLA riescano a tollerare il glutine ed altri no. Molti tentativi di isolare l’antigene bersaglio degli anticorpi anti-endomisio erano basati su western-blot o cromatografia d’affinità tra siero di soggetti celiaci e estratti proteici ottenuti da tessuti contenenti endomisio (esofago di scimmia, cordone ombelicale umano). Solo nel 1997, un gruppo tedesco riuscì a Fig. 5.6 Diagramma di una reazione di immunoprecipitazione identificare l’antigene per mezzo di una classica metodica biochimica: l’immunoprecipitazione 54 . In pratica, si trattava di trovare le condizioni ideali perché l’incontro tra il siero e l’antigene in fase solubile portasse alla formazione di complessi macromolecolari insolubili che potevano essere poi
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