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La Diagnosi di Laboratorio delle Malattie da Protozoi - tutte mappe

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2. Colorazione <strong>di</strong> Dobell<br />

Una goccia della <strong>di</strong>luizione del copros viene posta su vetrino portaoggetto, si aggiunge<br />

ad essa una goccia della soluzione <strong>di</strong> Dobell preparata in giornata (tende a scolorirsi<br />

con il tempo perdendo le capacità tintoriali), si mescolano il campione con il<br />

colorante e si ricopre con vetrino coprioggetto.<br />

Il preparato con soluzione <strong>di</strong> Dobell è utilizzato per colorare i vacuoli <strong>di</strong> glicogeno ed<br />

i nuclei <strong>delle</strong> cisti eventualmente presenti. Con questo tipo <strong>di</strong> preparato è generalmente<br />

possibile effettuare la <strong>di</strong>agnosi <strong>di</strong> specie <strong>delle</strong> cisti, perché il Lugol rende più<br />

visibili i nuclei, pertanto è più facile poterli contare all’interno della cisti osservata.<br />

L’osservazione microscopica si esegue prima con obiettivo 10x e poi con obiettivo 40x.<br />

Precisti <strong>di</strong> Entamoeba histolytica/<strong>di</strong>spar<br />

(Col. Dobell)<br />

3. Colorazione <strong>di</strong> blu <strong>di</strong> metilene<br />

Cisti <strong>di</strong> Entamoeba histolytica/<strong>di</strong>spar<br />

(Col. Dobell)<br />

Può essere allestita quando nel preparato con soluzione fisiologica vengono visti trofozoiti<br />

amebici, o quando si sospetta la loro presenza. Si procede come i preparati con<br />

soluzione fisiologica e con soluzione <strong>di</strong> Dobell ponendo però sul vetrino una grande<br />

goccia <strong>di</strong> soluzione tamponata <strong>di</strong> blu <strong>di</strong> metilene. <strong>La</strong> colorazione è illustrata nel dettaglio<br />

nella parte iniziale <strong>di</strong> questo capitolo.<br />

Attendere 5 - 10 minuti prima <strong>di</strong> esaminare il vetrino per permettere al colorante <strong>di</strong><br />

penetrare nei trofozoiti<br />

Il blu <strong>di</strong> metilene sovracolora i trofozoiti in circa 30 minuti, quin<strong>di</strong> il preparato va<br />

esaminato entro questo lasso <strong>di</strong> tempo<br />

Questo tipo <strong>di</strong> preparato va effettuato solamente con copros fresco e non può essere<br />

utilizzato con campioni conservati in cui i trofozoiti sono stati uccisi.<br />

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