La Diagnosi di Laboratorio delle Malattie da Protozoi - tutte mappe

2. Immunofluorescenza Indiretta (IFI)
Il vetrino con pozzetto per IFI, contenente il campione da analizzare, viene fissato
con acetone per 5’
• Si lascia asciugare
• Depositare 20µl di anticorpo monoclonale (specifico per le proteine presenti sulla
superficie dei tachizoiti) su ciascun pozzetto.
• Incubare i vetrini per 30’ a 37°C in camera umida
• Lavare il vetrino in PBS 7.2
• Lasciare asciugare
• Depositare 20µl di anticorpo coniugato anti IgG di topo (diluito 1/10 in PBS)
marcato con isotiocianato di fluoresceina su ciascun pozzetto
• Incubare i vetrini per 30’ a 37°C in camera umida
• Lavare il vetrino in PBS 7.2
• Lasciare asciugare il vetrino, montare con glicerina tamponata
Osservare al microscopio a fluorescenza con obiettivo 40 e 100x
Se presenti i tachizoiti di Toxoplasma gondii. appariranno
come corpiccioli di 4 a 8µ e il diametro da 2 a 3µ a mezzaluna
disposti spesso a due a due colorati in verde brillante.
Tachizoiti di Toxoplasma gondii (IFI +)
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