La Diagnosi di Laboratorio delle Malattie da Protozoi - tutte mappe

4. Enterotest
• Viene effettuato al paziente digiuno.
• È costituito da un filo lungo 140 cm (90 cm per uso pediatrico) terminante con un
peso di gomma al silicone; il tutto è contenuto in una capsula di gelatina, da cui
sporge un filo.
• Si fissa il capo del filo ad una guancia e si fa ingerire la capsula con un bicchiere
d’acqua.
• Il capo zavorrato del filo raggiunge l’intestino tenue, dove viene tenuto per 4 ore.
• Si estrae il filo e si invia in laboratorio in un contenitore sterile.
• Con dita guantate, si preleva la patina di materiale che il filo ha raccolto dalla
mucosa dell’intestino tenue; si pone il materiale prelevato su vetrini per l’esame a
fresco e per le colorazioni permanenti.
5. Ricerca in Immunoflorescenza Diretta (IFD)
Depositare 25µl di una sospensione di copros (3 g di copros stemperato in 1-2ml di
soluzione fisiologica) sul pozzetto di un vetrino per immunofluorescenza
• Lasciar asciugare all’aria il preparato per 24 h.
• Fissare in acetone.
• Deporre 20µl di anticorpo monoclonale anti cisti di Giardia marcati con FITC,
diluiti in soluzione proteica tamponata, sul pozzetto.
• Incubare in camera umida a temperatura ambiente per 30’.
• Lavare con acqua distillata delicatamente e lasciar asciugare.
• Depositare una goccia di glicerina tamponata sul pozzetto, coprire con coprioggetto.
• Osservare con microscopio a fluorescenza l’intero preparato con obiettivo 20 e 40x.
• I protozoi eventualmente presenti appariranno di color verde mela sul fondo neromarrone.
G. duodenalis in immunofluorescenza (IFD)
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