La Diagnosi di Laboratorio delle Malattie da Protozoi - tutte mappe

COLORAZIONE DI ZIEHL-NEELSEN MOD.
La parete delle oocisti dei coccidi, come quella di alcuni batteri, come i micobatteri,
ha la particolare capacità di assumere stabilmente il colorante fucsina che non viene
più allontanato in seguito al trattamento con acido ed alcool.
Per questa ragione i microrganismi che presentano tale caratteristica, vengono chiamati
acido-alcool resistenti.
La colorazione per l’acido-resistenza modificata da Kinyoun viene chiamata “metodo
a freddo” in quanto impiega un detergente tensioattivo, il dimetilsuffossido DMSO,
che aggiunto alla fucsina facilita la penetrazione di questa all’interno della parete del
parassita, senza dover ricorrere necessariamente al riscaldamento del colorante.
COMPOSIZIONE DEI COLORANTI:
1) Soluzione Fucsina Fucsina basica 0.3%
Fenolo 5%
Alcool etilico 95° 10%
2) Soluzione Alcool-Acido Alcool etilico 95° 97%
Acido cloridrico 3%
3) Soluzione colorazione di contrasto Verde malachite 0.3%
PREPARAZIONE DEL COLORANTE:
1) Soluzione Fucsina:
sciogliere 3 grammi di fucsina basica in 10ml di Alcool etilico al 95%.
Aggiungere 90ml di una soluzione acquosa di fenolo al 5%;
2) Soluzione Alcool-Acido:
aggiungere 3ml di Acido cloridrico concentrato, lentamente (a goccia a goccia) a
97 ml di Alcool etilico al 95%, in quest’ordine.
Fare attenzione perché la soluzione può diventare molto calda!
3) Soluzione di verde malachite:
sciogliere 3ml di verde malachite in 100ml di acqua distillata, oppure 3ml di blu
di metilene in 100ml di acqua distillata.
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