La Diagnosi di Laboratorio delle Malattie da Protozoi - tutte mappe

Aspirato linfonodale
Ricerca di Leishmania
L’aspirato linfonodale, se di consistenza poco solida, viene solo centrifugato a 2000
giri per 10’. Il sedimento ottenuto, viene risospeso in un piccolo volume di acqua
distillata sterile, e 20µl di questa sospensione vengono posti su ciascun vetrino per le
colorazioni e per la coltura.
Se, invece, è di consistenza solida, come un pezzo di tessuto, si preparano:
• “impressioni” su vetrino per le colorazioni,
• si stempera il pezzo di tessuto in una provetta sterile con fisiologia in modo da
frammentare quanto più possibile il campione in pezzi più piccoli e,
• 5-7 gocce di questo preparato vanno insemenzati nel terreno di coltura EMTM
La diagnosi di laboratorio si fonda:
Metodi diretti
1. Colorazione May-Grunwald Giemsa (MGG)
2. Coltura
1. Colorazione di MayGrunwal-Giemsa (MGG)
Il vetrino, colorato, viene osservato al microscopio ottico con obiettivo 100x.
L’osservazione del linfonodo è più difficile degli altri materiali biologici, in quanto il
tessuto è più compatto e spesso il riconoscimento degli amastigoti risulta difficile.
Se positivo, si evidenzieranno gli amastigoti di Leishmania, intra ed extracellulari,
come corpiccioli rotondeggianti od ovoidali della grandezza di 1.5-4µ con nucleo
eccentrico, cinetoplasto bastoncellare affianco al nucleo, entrambi colorati in rosso
violaceo e con citoplasma colorato in azzurro.
Amastigoti di Leishmania: Aspirato linfonodale
200x (Col. MGG)
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Amastigoti di Leishmania: Aspirato linfonodale
1000x (Col. MGG)
2. Coltura
Viene eseguita utilizzando la stessa metodica descritta per il biopsato cutaneo.