La Diagnosi di Laboratorio delle Malattie da Protozoi - tutte mappe

) La soluzione di uso è formata da:
Soluzione madre ml.100
Idrossido di sodio al 40% ml. 7.5
Acqua distillata a volume l. 1
Si aggiusta il ph a 7-7.3
Si distribuisce in beute da 500ml, si sterilizza a 121°C per 15’ si conserva in frigorifero
a 4°C fino a tre mesi.
6) Siero fetale di vitello
Una volta preparata tutta la fase liquida essa si completa per costituire il terreno BR
Terreno BR:
Il terreno così preparato è conservato in frigorifero a 4°C per 3mesi.
Allestimento della coltura
50ml. di terreno R (soluzione d’uso)-(5)
50ml di Siero fetale di vitello- (6)
10ml di Tampone ftalato-(4)
90ml di acqua distillata sterile
8ml di eritrocina-(1)
10ml di Bactopeptone-(2)
Sospensione di Escherica coli
Al momento di insemenzare il campione di copros la fase solida si pone in contatto
con la fase liquida seguendo questo protocollo:
In una boccetta con Agar salino (1) viene messa una spatolina (10µg) di Amido di
riso (3)+ 2ml di BR+ 0,5 di inoculo di materiale di copros.
Incubare per 24h a 37°C
Il sovranatante, dopo 24 h, viene eliminato e sostituito da 2ml di BR fresco+una scatolina
di amido di riso e la coltura viene posta nuovamente a 37°C per 48h.
Si elimina il sovranatante ed il sedimento viene osservato al microscopio a 200-400x
per l’eventuale identificazione delle amebe.
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