La Diagnosi di Laboratorio delle Malattie da Protozoi - tutte mappe
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Preparazione dei vetrini<br />
Lievi variazioni devono essere adottate nella preparazione degli strisci, nei tempi e<br />
nelle sequenze <strong>di</strong> colorazione in funzione del fissativo usato (se usato).<br />
A. Materiale fresco non conservato<br />
1. Non appena il campione perviene al laboratorio, stenderne uno strato <strong>di</strong> spessore<br />
variabile (sottile e spesso) sopra ad un vetrino portaoggetti pulito. Se necessario<br />
<strong>di</strong>luire le feci in soluzione fisiologica.<br />
2. Porre i vetrini in fissativo <strong>di</strong> Schau<strong>di</strong>nn, prima che gli strisci si secchino.<br />
3. I vetrini devono rimanere a riposo nel fissativo <strong>di</strong> Schau<strong>di</strong>nn per almeno un’ora<br />
per un adeguato fissaggio. È possibile prolungare il fissaggio anche per una notte.<br />
4. Procedere alla colorazione iniziando <strong>da</strong>l punto 1 della “colorazione”.<br />
B. Materiale conservato in SAF Fixative (So<strong>di</strong>o-Acetato-Formalina)<br />
1. I campioni <strong>di</strong> copros raccolti in SAF Fixative devono essere lasciati fissare per<br />
almeno 30’.<br />
2. Mescolare bene il campione <strong>di</strong> copros raccolto nel liquido conservante.<br />
3. Concentrare il materiale per filtrazione e centrifugazione.<br />
4. a) Su un vetrino portaoggetti pulito depositare 2-3 gocce <strong>di</strong> Mayer’s Albumin.<br />
b) Aggiungere una piccola quantità <strong>di</strong> se<strong>di</strong>mento alla Mayer’s Albumin.<br />
Utilizzando un bastoncino <strong>di</strong> legno, mescolare e stendere la miscela<br />
albumina/campione sul vetrino in modo che vi rimanga adeso uno strato <strong>di</strong> spessore<br />
variabile (sottile e spesso). <strong>La</strong>sciare asciugare i vetrini a temperatura ambiente,<br />
lontano <strong>da</strong> fonti <strong>di</strong> calore.<br />
5. Procedere alla colorazione, iniziando <strong>da</strong>l punto 3 della “colorazione”.<br />
C. Materiale conservato in PVA Fixative (Alcool-Polivinilico)<br />
1. I campioni <strong>di</strong> copros raccolti in PVA Fixative devono essere lasciati fissare per<br />
almeno 30 minuti.<br />
2. Agitare vigorosamente il campione raccolto nel liquido conservante.<br />
3. Stendere, senza strisciare, 2 o 3 gocce del campione su 1/3 - 1/2 della superficie<br />
<strong>di</strong> un vetrino portaoggetti pulito.<br />
4. Far asciugare il vetrino per una notte a temperatura ambiente. In via alternativa lo<br />
si può porre per alcune ore a 37°. Il vetrino dovrà essere perfettamente asciutto,<br />
onde prevenire il <strong>di</strong>stacco del materiale, durante la colorazione.<br />
5. Procedere alla colorazione iniziando <strong>da</strong>l punto 1 della “colorazione”.<br />
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