La Diagnosi di Laboratorio delle Malattie da Protozoi - tutte mappe

Coltura
Il terreno di coltura delle amebe è abbastanza complesso e richiede notevole accortezza
e pratica per potere essere eseguita correttamente.
Il terreno è difasico, costituito cioè da una fase solida e una fase liquida.
La fase solida e formata da :
1) Agar salino preparato da: Agar polvere gr. 1.5
sodio cloruro mg. 700
acqua distillata ml 100
Autoclavare a 121°C per 15-20’.
Distribuire, quando si raffredda, in boccette con tappo a vite da 5ml in quantità di
2.5 e lasciare solidificare a becco di clarino. L’agar salino, così preparato si conserva
in frigorifero per 3 mesi.
La fase liquida è formata da:
1) Eritrocina preparata con Eritrocina base mg.200
Etanolo 70% ml 1.0
Si pesa l’eritrocina, si mette in falcon e si aggiunge 1ml di alcool.
Agitare al vortex, dopo 2h, si agita ancora e si porta a volume con 50 ml di acqua
distillata . Si conserva in frigorifero.
2) Bactopeptone preparato da: Bactopeptone gr 20
Acqua distillata ml 100
Si distribuisce in provette da 10ml, si sterilizza in autoclave a 121°C per 15-20’ e si
conserva in frigorifero.
3) Amido di riso sterilizzato a secco in stufa ( 90’ a 150°C)
4) Tampone ftalato preparato con Potassio ftalato gr.10.2
Idrossido di sodio al 40% ml. 5
Dopo solubilizzazione portare a volume con 100ml di acqua distillata, sterilizzare in
autoclave a 121°C per 15’. Conservare in frigorifero.
5) Terreno R composto da una soluzione madre e quindi da una soluzione di uso:
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a) La soluzione madre concentrata è formata da:
Sodio cloruro gr. 50
Acido citrico monoidrato gr 20
Potassio fosfato monoidrato gr 5
Ammonio solfato gr. 10
Magnesio solfato eptaidrato mgr. 500
Acido lattico al 90% ml 40
Acqua distillata a volume l. 1